[发明专利]耐药表型快速检测药敏平板及耐药表型快速检测方法

说明书

一种耐药表型快速检测药敏平板及耐药表型快速检测方法，用于耐药表型快速检测，在药敏平皿内的M‑H琼脂厚度均匀地铺设为3mm构成tMHA。在tMHA上涂布2.0～3.0麦氏单位菌液后贴药敏纸片，仅需4～6小时的培养，即可根据抑菌环直径判断出是否为相应的耐药表型。本发明公开了一种薄型M‑H药敏平板，可以将细菌耐药表型检测的时间从现有技术最快的16‑24小时缩短到4‑8小时，快速简便地检测细菌耐药表型对及时有效地抗感染治疗有非常重大的临床意义，利于临床的及时治疗和医院感染的防控。

技术领域

本发明涉及细菌耐药表型检测，具体说是一种耐药表型快速检测药敏平板及其使用方法。

背景技术

随着抗生素在世界范围内的广泛使用，细菌对抗生素的耐药性也随之而来。细菌对抗生素的耐药性有多种机制，例如产生水解酶，膜通透蛋白的缺失等。目前细菌的耐药性已经成为威胁人类健康的重要因素，每年全球死亡的病因中感染性疾病占第一位。耐碳青霉烯肠杆菌(CRE)、产超广谱beta-内酰胺酶(ESBL) 的肠杆菌等耐药株在全球范围内广泛传播。在中国，肺炎克雷伯菌中CRE菌株已经达到9％，在一些地区甚至已经超过20％，而CRE感染引起的粗死亡率已经超过30％。因此快速地检测这些耐药菌的耐药表型对有效地抗感染治疗和医院感染的防控有很重要的意义。

目前美国实验室标准化委员会(CLSI)针对这些细菌耐药表型也推荐了很多细菌耐药表型检测方法，比如MRS、ESBL、mCIM、eCIM等方法检测方法，这些表型检测方法使用的药敏平板均是Mueller-Hinton(M-H)琼脂平板,平板的 M-H琼脂厚度为4mm[见参考文献1，2]。这些表型检测方法均将待测菌涂布在 M-H琼脂平板,在贴上不同的药敏纸片，根据抑菌环的大小或形状的改变来判断其耐药表型，因为在M-H琼脂平板形成肉眼可见的抑菌环一般需要16-24小时，故这些检测方法大多需要16-24小时，不利于临床的及时治疗和医院感染的防控。虽然分子生物学和质谱的方法可以快速地进行检测，但这些方面对设备和技术的要求较高，不利于临床实验室常规开展。

因此快速简便地检测细菌耐药表型有非常现实的意义，对及时有效地抗感染治疗有非常重大的临床意义。

参考文献：

1.Clinical and Laboratory Standards Institute.2012.PerformanceStandards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests,11th ed.Approvedstandard M2-A11.CLSI, Wayne,PA

2.CLSI.Performance Standards for Antimicrobial SusceptibilityTesting.29th ed.CLSI supplement M100.Wayne,PA:Clinical and LaboratoryStandards Institute； 2019.

发明内容

本发明的第一目的在于提供耐药表型快速检测方法所使用的药敏平皿，使细菌在药敏平板上可以快速形成肉眼可以的菌膜。

本发明的第二个目的在于提供一种细菌在薄M-H平板上生长出肉眼可以的菌膜的方法，将检测时间从传统的16-24小时大幅缩短。

为实现上述目的，本发明的技术方案为，所述的耐药表型快速检测药敏平板，用于耐药表型快速检测，其特征在于：包括无菌的药敏平皿和所述药敏平皿内的M-H琼脂；

所述药敏平皿是底面为平面的敞口器皿，底面为连续整面，边缘外凸或平直，相当直径为6～15cm，器皿的深度大于3.5mm；

所述M-H琼脂厚度均匀地铺设于药敏平皿的底面上，厚度为3.0±0.1mm。