[发明专利]瑶药材益母姜二氯甲烷部位HPLC指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.瑶药材益母姜二氯甲烷部位HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）制备供试品溶液：准确称取益母姜药材2.0000 g，精密加入体积分数为70%的乙醇溶液50ml，称定重量，超声60 min，放冷后称重，补足减失的重量，滤过，滤液精密加入3mol/ml的盐酸溶液20 ml，水浴回流2 h，放冷后，用质量分数为40%的氢氧化钠溶液调至中性，水浴蒸干，残渣用30 ml热水溶解并转移至分液漏斗中以二氯甲烷萃取，萃取2次，每次30 ml，合并二氯甲烷部分，挥干，残渣用甲醇定容至10 ml棕色容量瓶中，进样前以0.22 µm有机滤膜滤过，即得；

（2）制备对照品溶液：精密称定薯蓣皂苷元标准品适量，用甲醇溶解，制成1 ml含薯蓣皂苷元0.428 mg的对照品溶液，于棕色的容量瓶中储存，进样前以0.22 µm有机滤膜滤过，即得；

（3）HPLC检测：分别吸取上述对照品溶液和供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中，根据色谱条件进行高效液相色谱检测，记录95min 内的HPLC 图谱；所述的色谱条件为：色谱柱ODS-SP C18，250×4.6 nm，5；检测波长203 nm；流速0.8 ml/min；柱温30 ℃；进样量10 ； 流动相A：乙腈；流动相B：0.1%磷酸；梯度洗脱条件如下：0～10 min，5%A+95%B；10～40 min，20%A+80%B；40～65 min，70%A+30%B；65～95 min，95%A+5%B；百分数表示流动相A和B所占的体积百分比；

（4）对多个供试品进行检测，利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件，通过多点校正的方法对所有色谱峰进行匹配，将自动生成对照指纹图谱R作为对照指纹图谱。