[发明专利]靶向人源化磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的嵌合抗原受体及其用途

权利要求书

1.一种核酸序列，所述核酸序列选自：含有依次连接的人DAP12的编码序列、T2A的编码序列、抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单链抗体的编码序列、人TREM1跨膜和胞内区的编码序列。

2.如权利要求1所述的核酸序列，其特征在于，所述核酸序列在所述抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单链抗体的编码序列前还含有信号肽的核酸序列，优选地，所述信号肽的核酸序列如SEQ ID NO:1第412-474位核酸所示；和/或所述抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体的核酸序列如SEQ ID NO:1第481-1251位多核酸所示；和/或所述人DAP12的核酸序列如SEQ ID NO:1第1-339位多核酸所示；和/或所述T2A的核酸序列如SEQ ID NO:1第355-405位核酸所示；和/或所述人TREM1跨膜和胞内区的核酸序列如SEQ ID NO:1第1288-1425位核酸所示。

3.一种融合蛋白，所述融合蛋白选自：含有依次连接的人DAP12、T2A、抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单链抗体、人TREM1跨膜和胞内区的融合蛋白；和限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且保留活化T细胞活性的衍生的融合蛋白；优选地，所述抗人源化磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体为huGPC3 scFv。

4.如权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一个或多个特征：所述融合蛋白在所述抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体的N端还含有信号肽，优选地，所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第138-158位氨基酸所示；所述抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第161-417位氨基酸所示；所述人DAP12的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-113位氨基酸所示；所述T2A的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第119-135位氨基酸所示；所述人TREM1跨膜和胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第430-474位氨基酸所示。

5.一种核酸载体，所述核酸载体含有权利要求1-2中任一项所述的核酸序列；优选地，所述核酸载体为慢病毒载体，含有权利要求1-2中任一项所述的核酸序列。

6.一种慢病毒，所述慢病毒含有权利要求5所述的核酸载体，优选含有所述慢病毒载体。

7.一种基因修饰的T细胞或含该基因修饰的T细胞的药物组合物，其特征在于，所述细胞含有权利要求1-2中任一项所述的核酸序列，或含有权利要求5所述的核酸载体，或感染了权利要求6所述的慢病毒，或稳定表达权利要求4中任一项所述的融合蛋白。

8.权利要求1-2中任一项所述的核酸序列、权利要求3-4中任一项所述的融合蛋白、权利要求5所述的核酸载体或权利要求7所述的慢病毒在制备活化的T细胞中的应用。

9.权利要求1-2中任一项所述的核酸序列、权利要求3-4中任一项所述的融合蛋白、权利要求5所述的核酸载体、权利要求6所述的慢病毒、或权利要求7所述的基因修饰的T细胞或其药物组合物在制备治疗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3介导的疾病的药物中的用途；优选地，所述磷脂酰肌醇蛋白聚糖3介导的疾病为脑癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、肝癌、肾脏癌、淋巴瘤、白血病、肺癌、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、间皮瘤、神经母细胞瘤、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、肾癌、皮肤癌、胸腺瘤、肉瘤、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、子宫癌，优选为肝癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌。