[发明专利]PCR预混液有效
| 申请号： | 201910517611.6 | 申请日： | 2019-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN110218777B | 公开（公告）日： | 2023-05-16 |
| 发明（设计）人： | 胡佳 | 申请（专利权）人： | 苏州天合优才生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人： | 李淑亚 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市吴中区太湖*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | pcr 预混液 | ||
1.PCR预混液，其特征在于，包括以下终浓度的组分：MgCl2 2～5mM，KCl 50～100mM，pH为8.3的Tris-HCl 10～30mM，BSA 0.8～4mg/ml，dNTP 150～250nM，热启动Taq酶0.05～0.2u/ul，体积分数为0.25～1％的甘油，体积分数为0.5～1％的PEG20000，体积分数为0.5～1％的PEG5000，体积分数为0.1～0.5％的PEG-PPG-PEG，鱼精DNA 0.5～5ng/ul，甜菜碱0.3～2.5M，体积分数为1.5～3％的DMSO，其中，PEG-PPG-PEG的平均分子量为5800；
还包括：ω-3脂肪酸0.2ng/ul，大豆甾醇A 0.1ng/ul；
还包括ω-3脂肪酸和大豆甾醇A的加入方法，具体为：将MgCl2，KCl，Tris-HCl，BSA，dNTP，热启动Taq酶，甘油，PEG20000，PEG5000，PEG-PPG-PEG，鱼精DNA，甜菜碱，DMSO制得混合液后，置于0～10℃的环境中，静置30min，加入ω-3脂肪酸，第一次超声处理，混合均匀，然后再置于35℃环境中，静置30min，加入大豆甾醇，第二次超声处理，混合均匀，即得所述PCR预混液。
2.如权利要求1所述的PCR预混液，其特征在于，第一次超声处理的频率为80kHz，超声时间30min，超声温度为10℃，第二次超声处理的频率为40kHz，超声时间20min超声温度为35℃。
3.如权利要求1所述的PCR预混液，其特征在于，还包括：ω-6脂肪酸0.1ng/ul。
4.如权利要求3所述的PCR预混液，其特征在于，还包括ω-6脂肪酸的加入方法，具体为：ω-6脂肪酸与ω-3脂肪酸一同加入混合液中。
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