[发明专利]PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用。本发明采用免疫组化方法检测PPFIBP1蛋白在肝癌组织中的相对表达量，以此判断肝癌患者术后生存期的长短。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用，提示该蛋白能用于制备判断肝癌患者预后的蛋白质分子标记，对于肝癌病人术后监控具有重要的指导意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种PPFIBP1蛋白的应用，具体涉及一种PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用。

背景技术

肝细胞肝癌是最常见的肝脏原发恶性肿瘤，在世界范围内每年新增病例50~10万，列恶性肿瘤发病率第五、死亡率第三。目前已经明确的肝癌致病因素包括嗜肝病毒感染、黄曲霉素、酒精、烟草、遗传代谢性肝病等。依附于不同人群暴露特点的差异，肝癌在各地的发病率也不尽相同。大多数高发地区（如亚、非两洲）病例主要源自乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染，在地理和人种上的分布与嗜肝病毒的流行病学特点相吻合。由于乙型肝炎的肆虐，全球肝癌病例有80％出现在亚洲，我国更是占据了其中大部分，每年新发病例超过35万，同期死亡病例达32万，高居男性癌症总体死亡率第2位、女性第3位，造成了极为沉重的疾病负担和经济压力。

随着诊断技术及治疗手段的进步，近二十年来疗效已经有了一定的提高，但肝癌的转移复发仍是影响长期疗效的重要阻碍。因此深入研究肝癌转移复发机制、探索有效预测肿瘤复发的分子标志物和积极的抗复发治疗措施是当前肝癌诊治中的重点和难点。

本发明首次将PPFIBP1引入了肝癌研究领域，发现PPFIBP1在肝癌中高表达，且其表达水平与肝癌临床病理特征及预后密切相关，提示PPFIBP1是一个新的肝癌预后标志物和术后预警蛋白。

发明内容

本发明的目的之一在于提供PPFIBP1蛋白的新应用，特别是PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用。

本发明经过广泛而深入的研究，首次发现，采用免疫组化方法检测PPFIBP1蛋白在肝癌组织中的表达量，能够判断肝癌患者出现肝癌复发转移的风险。基于PPFIBP1蛋白表达量与肝癌复发转移的相关性，以PPFIBP1蛋白作为预后标志物对其表达量进行检测可以用于指导肝癌的预后判断。

因此，本发明提供了PPFIBP1蛋白在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用，该应用是以PPFIBP1蛋白作为分子标记，利用PPFIBP1抗体，结合免疫组化实验试剂，检测PPFIBP1蛋白在肝癌组织中的相对表达量，并根据PPFIBP1蛋白在肝癌组织中的相对表达量进行肝癌术后预后评估。

所述PPFIBP1蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了所述应用中用于肝癌术后预后评估的试剂盒，该试剂盒包括：人源PPFIBP1多克隆抗体、免疫组化实验试剂。所述免疫组化实验试剂为本领域免疫组化实验中的常用试剂。

进一步，所述人源PPFIBP1多克隆抗体由序列为SEQ ID NO.1所示的PPFIBP1蛋白免疫兔子获得，可自行制备，也可采用市购商品。

进一步，所述免疫组化实验试剂包括：二甲苯、无水乙醇、H2O2去离子水溶液、封闭用正常山羊血清工作液、辣根过氧化物酶化二抗工作液、浓缩型DAB显色试剂、苏木素液、水溶性封片剂、磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液抗原修复液以及PV9000聚合物增强剂。

利用本发明所述试剂盒进行肝癌术后预后评估的方法如下：

利用人源PPFIBP1多克隆抗体，结合免疫组化实验试剂，对肝癌组织切片进行免疫组化染色；

获取免疫组化染色后的肝癌组织切片的免疫组化图片；