[发明专利]一种青霉菌酯-Ⅲ化合物及其制备方法、制剂与应用

权利要求书

1.一种青霉菌酯-Ⅲ化合物，其特征在于，所述青霉菌酯-Ⅲ化合物是从重楼Paris L.的内生真菌Penicillium sp.中分离得到，该化合物命名为青霉菌酯-Ⅲ，其分子式为C₂₁H₂₆O₇，结构式为：

。

2.一种权利要求1所述的青霉菌酯-Ⅲ化合物的制备方法，其特征在于，所述青霉菌酯-Ⅲ化合物是从重楼Paris L.的内生真菌Penicillium sp.中分离得到，具体包括以下步骤：

（1）重楼内生真菌的分离纯化

将新鲜滇重楼块茎经清洗，切成小块，然后于70%乙醇中浸泡40s，冲洗后切去外表皮，并插入查氏培养基恒温培养3~7天至滇重楼组织块表面及边缘有真菌菌落长出，挑取菌落上层少量菌丝于查氏培养基上多级纯化，最后转入PDA斜面得到纯化菌株；

（2）真菌代谢物的提取、分离纯化

对液体培养的真菌发酵20~40天，搜集发酵物，发酵物经乙醇浸泡6~8天，期间超声处理提取2~4次，提取液浓缩除去乙醇，余下液体部分加水，用乙酸乙酯萃取4~5次，直至无色，减压浓缩得到发酵物乙酸乙酯部分浸膏，将浸膏用甲醇完全溶解，用200~300目硅胶拌样，干法上样，以100~200目硅胶柱进行层析，用10:1~0:1浓度石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，洗脱液减压浓缩，TLC检测合并，得4个组分Fr.1~Fr.4，其中用10:1~6:1浓度石油醚/乙酸乙酯洗脱后的洗脱液为Fr.4；

组分Fr.4用硅胶柱层析，经50:1~0:1浓度石油醚/乙酸乙酯洗脱液进行梯度洗脱，其中用50:1~30:1浓度石油醚/乙酸乙酯洗脱后剩余的沉淀即为组分Fr.4-3，然后用甲醇多次洗脱得到青霉菌酯-Ⅲ化合物C₂₁H₂₆O₇。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述清洗是用自来水清洗表面泥土。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述切成小块是将块茎切成2~4cm的小块。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述冲洗是将浸泡后的滇重楼去乙醇后用无菌水冲洗2~4次，0.1% HgCl₂溶液漂洗2.5min，再用无菌水冲洗4~6次。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述恒温培养的温度为26~30℃。

7.一种权利要求1所述的青霉菌酯-Ⅲ化合物的制剂，其特征在于，所述青霉菌酯-Ⅲ化合物中加入药学上可接受的药用辅料和/或赋形剂制成水剂、片剂、颗粒剂或微乳剂。

8.一种权利要求1所述的青霉菌酯-Ⅲ化合物的应用，其特征在于，所述青霉菌酯-Ⅲ化合物在制备防治烟草花叶病毒药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的青霉菌酯-Ⅲ化合物的应用，其特征在于，在制备防治烟草花叶病毒药物中的青霉菌酯-Ⅲ化合物溶液浓度为0.5~50μg/mL。