[发明专利]果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法

权利要求书

1.一种果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，包括以下步骤：

步骤（一）样品的制备：取果蔬样品进行磨碎并混合均匀，将混合后的样品准确称取10g，并加入到离心管中备用；

步骤（二）待净化样品的提取：向装有样品的离心管中加入20mL乙腈震荡提取，并进行离心，吸取上层清液获得第一次提取液，并向残渣再加入乙腈震荡提取并离心获得第二提取液，合并第一次提取液和第二次提取液，并加入到平底烧瓶中，放置在旋转蒸发仪中旋蒸至近干，加入甲苯溶解形成待净化样品溶液待用；

步骤（三）待净化样品溶液的净化：将甲苯和乙腈以1：3混合形成洗脱液，采用洗脱液淋洗固定相萃取柱，当液面接近固定相萃取柱填料表面时，将步骤（二）中的待净化样品溶液加入固定相萃取柱，再用洗脱液对待净化样品溶液洗脱，收集样液和洗脱物到平底烧瓶中，在旋转蒸发仪中旋蒸至近干，加入甲苯溶解定容，经0.22μm微孔滤膜过滤至进样瓶中，形成待测样品溶液；

步骤（四）标准工作溶液的配制：以甲苯为溶剂配制甲基异柳磷阶梯浓度分别为2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0 ng/mL 、20.0 ng/mL 和50.0 ng/mL的标准工作溶液;

步骤（五）待测样品溶液的检测：将步骤（三）中的待测样品溶液和步骤（四）中的标准工作溶液在气相色谱-串联质谱仪上分别进样，获得以标准溶液中甲基异柳磷的浓度为横坐标，再以甲基异柳磷的峰面积为纵坐标的工作曲线，获得可以确定母离子的一级质谱图，确定母离子后，采用子离子扫描获得二级质谱图，从二级质谱图中选取定量离子对和定性离子对，根据工作曲线对定量离子进行定量计算，获得待测样品溶液中甲基异柳磷的浓度;

步骤（六）果蔬样品中甲基异柳磷含量计算：根据w=cv/m进行计算，其中的w为样品中甲基异柳磷的含量，单位为µg/kg，其中的v为样品定容体积，单位为mL，其中的m为样品称重质量，单位为g，其中的c为仪器测得甲基异柳磷的浓度，单位为ng/mL。

2.根据权利要求1所述的果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：所述步骤（二）中提取获得第一次提取液的过程中还包括依据果蔬样品含水量加入4-7g氯化钠并进行震荡。

3.根据权利要求1所述的果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：所述步骤（二）和步骤（三）中旋转蒸发仪水浴温度≤35℃设置。

4.根据权利要求1所述的果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：所述步骤（三）中的固定相萃取柱为CNWBOND GCB/NH2 SPE柱，规格为500mg/500mg，6mL。

5.根据权利要求1所述的果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：步骤（五）中气相色谱和串联质谱的参数条件如下：

色谱柱：选用超惰性柱，HP-5MS UI，30 m×0.25 mm×0.25 μm；

流速：1.0 ml/min 高纯氦；

仪器：Agilent 7890B-7000C GC-MS/MS；

碰撞气：高纯氮，1.5ml/min；

猝灭气：高纯氦，2.25ml/min；

升温程序：起始温度为100℃，以每分钟升高25℃的速度升至150℃，并在150℃下保持2分钟，再以每分钟升高15℃的速度升至300℃，并在300℃下保持3分钟；

进样口温度：250℃；

接口温度：280℃；

进样量：1µL；

离子化：EI源；

进样方式：脉冲不分流进样，25 psi。