[发明专利]果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法

说明书

本发明公开了一种果蔬中甲基异柳磷的固相萃取‑气相色谱‑串联质谱检测方法，经过样品制备，待净化样品的提取、待净化样品溶液的净化、标准工作溶液的配制、待测样品溶液的检测和果蔬样品中甲基异柳磷含量计算，本发明能够测定果蔬中甲基异柳磷农药。蔬菜和水果样品用乙腈提取，经GCB/NH2固相萃取柱净化后，目标分析物在多反应监测模式下以保留时间和离子对信息比较进行定性分析，外标法定量，本方法实验过程简便、分析速度快、抗背景干扰能力强、灵敏度高、重现性和准确度好，为评价蔬菜和水果样品的质量提供了新的检测方法。

技术领域

本发明涉及食品检测领域，涉及固相萃取-气相色谱-串联质谱法，具体是指一种蔬菜和水果中甲基异柳磷的检测方法。

背景技术

农药是指用于防治、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草和其他有害物质以及有目的地调节植物、昆虫生长的化学合成或者来源于生物及其他天然物质的一种物质或几种物质的混合物及其制剂。除了少量不用农药的有机农作物外，几乎所有作物都离不开农药。农药的分类按用途可以分为杀虫剂、杀菌剂、杀螨剂和植物生长调节剂。

甲基异柳磷是一种高毒的有机磷类土壤杀虫剂，对害虫具有较强的触杀和胃毒作用。杀虫广泛、药效期长，是防治地下害虫的优良药剂。 主要用于蔬菜、谷物、果树等作物防治蛴螬、蝼蛄、金针虫等地下害虫，也可用于防治粘虫、蚜虫、烟青虫、桃小食心虫、红蜘蛛等。甲基异柳磷能强烈抑制人体内胆碱酯酶活性，引起严重的毒蕈样、烟碱样和中枢神经系统症状。在国标GB 2763《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》中也对甲基异柳磷在蔬菜、水果、谷物等食品上残留进行了临时限量要求，规定了在蔬菜和水果中甲基异柳磷的临时限量为0.01mg/kg。因此，建立准确、可靠地测定蔬菜和水果中甲基异柳磷的含量非常重要。

但目前的检测方法，只能通过气相色谱发，只能通过保留时间、响应峰面积进行定性定量，缺少实质性判定依据；而相关文献中使用的气相色谱-质谱联用仪通过保留时间、质谱图和选择离子峰面积进行定性定量，虽然丰富定性判定信息，但对净化要求较高，尤其是复杂基体背景干扰较大的样品，无法满足定性定量要求，上述两种检测方法均容易发生漏判和误判。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，该方法结合固相萃取-气相色谱-串联质谱法，能够对蔬菜和水果中甲基异柳磷进行测定，该方法具有前处理简单快速、抗基质干扰强、确证准确、灵敏度高的优点，为甲基异柳磷的快速、准确检测提供了可靠的分析方法。

本发明提供一种果蔬中甲基异柳磷的固相萃取-气相色谱-串联质谱检测方法，包括以下步骤：

步骤（一）样品的制备：取果蔬样品进行磨碎并混合均匀，将混合后的样品准确称取10g，并加入到离心管中备用；

步骤（二）待净化样品的提取：向装有样品的离心管中加入20mL乙腈震荡提取，并进行离心，吸取上层清液获得第一次提取液，并向残渣再加入乙腈震荡提取并离心获得第二提取液，合并第一次提取液和第二次提取液，并加入到平底烧瓶中，放置在旋转蒸发仪中旋蒸至近干，加入甲苯溶解形成待净化样品溶液待用；

步骤（三）待净化样品溶液的净化：将甲苯和乙腈以1：3混合形成洗脱液，采用洗脱液淋洗固定相萃取柱，当液面接近固定相萃取柱填料表面时，将步骤（二）中的待净化样品溶液加入固定相萃取柱，再用洗脱液对待净化样品溶液洗脱，收集样液和洗脱物到平底烧瓶中，在旋转蒸发仪中旋蒸至近干，加入甲苯溶解定容，经0.22μm微孔滤膜过滤至进样瓶中，形成待测样品溶液；

步骤（四）标准工作溶液的配制：以甲苯为溶剂配制甲基异柳磷阶梯浓度分别为2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0 ng/mL 、20.0 ng/mL 和50.0 ng/mL的标准工作溶液。