[发明专利]一种高效液相色谱串质谱联用技术测定血斑中叶酸的方法在审
| 申请号： | 201910526597.6 | 申请日： | 2019-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN110146626A | 公开（公告）日： | 2019-08-20 |
| 发明（设计）人： | 黄泽博;朱监宝;官培龙;于嘉屏 | 申请（专利权）人： | 上海可力梅塔生物医药科技有限公司;上海爱可赛默医疗器械有限公司;广州可力质谱医疗器械有限公司;江苏可力色质医疗器械有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 200433 上海市杨浦区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高效液相色谱 甲基四氢叶酸 技术测定 质谱联用 标准品 叶酸 时间成本 特异性强 校准曲线 灵敏度 同位素 内标物 前处理 再利用 标定 质谱 耗时 节约 | ||
1.一种高效液相色谱串质谱联用技术测定血斑中叶酸的方法，其特征在于，
所述的叶酸分别为叶酸和5-甲基四氢叶酸；
采用高效液相色谱串质谱联用技术测定血斑中叶酸的方法包括如下步骤：先用高效液相色谱将叶酸和5-甲基四氢叶酸分离，再利用质谱同位素内标定量法，以标准品的浓度为X轴，标准品与内标物的峰面积为比值为Y轴，建立校准曲线，计算上述叶酸和5-甲基四氢叶酸的含量，具体的色谱条件为：
(1)色谱条件
色谱柱为Phenomenex2.6μm F5 100A°；流动相A为0.1vt％甲酸的水溶液；流动相B为0.1vt％甲酸的乙腈溶液；柱温为40℃；进样量为5μL；采用梯度模式洗脱，见表1；
表1 流动相梯度洗脱参数
时间/min 流速/μL/min A/％ B/％ 0.01 500 90 10 4.00 500 50 50 4.05 500 10 90 4.85 500 10 90 4.90 500 90 10 7.00 500 90 10
(2)质谱条件
在电喷雾离子正离子检测模式下，采用MRM扫描分析，离子源参数：雾化气流量为3L/min；干燥气流量为2L/min；加热气流量为15L/min；DL管温度为100-400℃；接口温度为100-400℃；加热块温度为100-400℃，CID气：100-300kPa；前体与产物离子通道如表2所示；
表2 多反应监测离子对及相应的电压参数
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