[发明专利]一种基于力编码的肿瘤标志物检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 201910527972.9 | 申请日: | 2019-06-18 |
公开(公告)号: | CN110387403B | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
发明(设计)人: | 姚立;鲁攀;于婵婵 | 申请(专利权)人: | 中国科学院化学研究所 |
主分类号: | C12Q1/6825 | 分类号: | C12Q1/6825;C12Q1/6834 |
代理公司: | 北京辰权知识产权代理有限公司 11619 | 代理人: | 佟林松 |
地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 编码 肿瘤 标志 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于,包括,
多种纳米传感器,磁珠,偶联或固定所述纳米传感器的固相基底;
每种所述纳米传感器包括核酸适配体,力编码序列,互补DNA序列;
每种所述纳米传感器中的所述核酸适配体、力编码序列和互补DNA序列均为单链寡聚核酸;
所述磁珠偶联于所述互补DNA序列;
所述力编码序列偶联或固定于所述固相基底;
每种所述纳米传感器中的所述核酸适配体可与目标分子特异性结合;
每种所述纳米传感器中,所述互补DNA序列与所述核酸适配体有第一互补配对区,所述第一互补配对区中碱基对的个数为5-25个;所述互补DNA序列与所述力编码序列之间有第二互补配对区,所述第一互补配对区与第二互补配对区有重叠区;
所述重叠区中碱基对的个数为1-5个。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述目标分子包括MUC1和HER2,相对应地,所述纳米传感器包括MUC1纳米传感器和HER2纳米传感器;
所述MUC1纳米传感器包括MUC1核酸适配体,MUC1力编码序列,MUC1互补DNA序列;
所述HER2纳米传感器包括HER2核酸适配体,HER2力编码序列,HER2互补DNA序列。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述MUC1核酸适配体的核酸序列为SEQ IDNO:1;所述MUC1力编码序列的核酸序列为SEQ ID NO:3;所述MUC1互补DNA序列的核酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5。
4.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述HER2核酸适配体的核酸序列为SEQ IDNO:2;所述HER2力编码序列的核酸序列为SEQ ID NO:6;所述HER2互补DNA序列的核酸序列为SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。
5.如权利要求2-4任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述MUC1纳米传感器和HER2纳米传感器的摩尔比为1-20:1-20。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述固相基底为玻璃基底或PDMS基底。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述固相基底的表面被醛基修饰。
8.权利要求1-7任一项所述试剂盒的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备偶联或固定所述纳米传感器的固相基底;
S2、组装纳米传感器:将力编码序列加入所述步骤S1制备的固相基底表面,进行第一孵育,使力编码序列连接在固相基底表面;将核酸适配体与互补DNA序列进行杂交,得到第一杂交核酸,将第一杂交核酸加入到连接有所述力编码序列的固定相基底,进行第二孵育,得到由第一杂交核酸与力编码序列形成的双链的第二杂交核酸,即为所述纳米传感器;
S3、连接磁珠:向所述步骤S2组装纳米传感器的固相基底加入磁珠,孵育,使磁珠连接于所述纳米传感器的互补DNA序列;
S4、磁化:对连接至所述纳米传感器的磁珠进行磁化。
9.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,步骤S1包括,对固相基底的表面依次进行羟基化修饰、氨基化修饰和醛基化修饰,得到醛基修饰的固相基底。
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