[发明专利]一种蛋鸭应激状态的鉴别方法

说明书

本发明提供了一种蛋鸭应激状态鉴别方法，所述方法包括：(1)笼养蛋鸭血液经处理得到的血浆作为待测组样品，平养蛋鸭血液经处理得到的血浆为对照组样品；(2)采用色谱‑质谱分析，得到质谱结果；(3)对下机数据库进行分析后，得到代谢物的鉴定结果和代谢物丰度结果；(4)对待测组样品和对照组样品中的特征标志物的表达量进行T‑检验；待测组样品和对照组样品相比，若D‑苯基乳酸的表达量出现显著下调(P＜0.05)，即蛋鸭正处于笼养应激反应期；否则蛋鸭正处于笼养应激恢复期。该方法能够简便、准确地鉴别蛋鸭应激状态。

技术领域

本发明涉及家禽育种与健康养殖技术领域，尤其涉及一种蛋鸭应激状态的鉴别方法。

背景技术

我国蛋鸭养殖量占世界的70％以上。随着设施化养殖的不断推广和人民对环保要求的日益提高，传统的蛋鸭水养模式因其生产效率低，环境污染大，逐渐受到挑战。目前，离水养殖成为主要的蛋鸭养殖手段。蛋鸭离水养殖主要采用三种方式，分别为：地面旱养模式、网床养殖模式和笼养模式。笼养模式因其生产效率高，蛋品洁净度好，粪污易于处理，逐渐被大型养殖企业和生产厂户接受。

但是，笼养蛋鸭存在着上笼应激问题，主要由于受环境限制，蛋鸭自然天性难以满足，应激反应明显。蛋鸭应激表现为体重减轻、体增重下降、采食量下降、抗病力降低等，应激造成的机体应激损伤需要一段时间才能够恢复。因此，可将蛋鸭上笼导致的生理性应激分为应激反应期和应激恢复期两个时期：第一阶段蛋鸭对刺激产生直接反应及代偿反应；第二阶段蛋鸭对笼养条件出现适应。对蛋鸭个体所处的上述两个阶段的科学鉴别，可广泛应用于笼养蛋鸭品种的选择，以及抗笼养应激蛋鸭新品种(系)的选育，还为饲养过程中的应对应激提供了新的靶点，具有重要的理论意义和实践意义。但是，基于体重、采食量、体增重、血清(浆)糖皮质激素含量、血清(浆)氧化应激指标、肠粘膜氧化应激水平等一系列指标综合检测，采样复杂，度量难度大，有时还要对个体进行屠宰，无法实现活体评价。

发明内容

本发明的目的在于提供了蛋鸭应激状态的鉴别方法，能够准确有效鉴别应激状态，简便、客观、精确，并有助于揭示蛋鸭笼养应激过程中的机体应答机制。

为实现上述目的，本发明是这样实现的：

本发明的目的在于提供了一种蛋鸭应激状态的鉴别方法，以D-苯基乳酸作为鉴别蛋鸭应激状态的特征标志物。

所述方法具体包括如下步骤：

步骤1、笼养蛋鸭血液经处理得到的血浆作为待测组样品，地面平养蛋鸭血液经处理得到的血浆为对照组样品；

步骤2、采用高效液相色谱-三重四级杆/超高场Orbitrap质谱分析所述待测组样品，得到质谱结果；

步骤3、对质谱结果中的下机数据库进行分析后，得到代谢物的鉴定结果和代谢物丰度结果；

步骤4、对待测组样品和对照组样品中的特征标志物的表达量进行T-检验，所述特征标志物为D-苯基乳酸；

待测组样品和对照组样品相比，若D-苯基乳酸的表达量出现下调，且差异显著P＜0.05，即蛋鸭正处于笼养应激反应期；否则蛋鸭正处于笼养应激恢复期。

本发明具备的有益效果是：

1、本发明提供的一种蛋鸭应激状态的鉴别方法，确定了以D-苯基乳酸作为鉴别蛋鸭应激状态的特征标志物，本发明筛选获得的标志代谢物D-苯基乳酸能够准确有效鉴别应激状态，并有助于揭示蛋鸭在笼养应激过程中的应答机制，标志代谢物的确定使分析更加简便、客观、精确；

本发明采用D-苯基乳酸作为用于鉴别蛋鸭应激状态的标志代谢物鉴别荆江蛋鸭三系配套商品代蛋鸭(实施例2)、山麻鸭(实施例3)、金定鸭(实施例4)与常规方法“体重变化数据、体增重数据、采食量情况数据、血清中D-乳酸情况、血清中内毒素情况、血清糖皮质激素变化数据、血清氧化应激指标，肠粘膜氧化应激指标等一系列指标结果”鉴别的结果一致。