[发明专利]一种与大豆植株分枝数显著相关的InDel标记及其应用有效
申请号: | 201910529784.X | 申请日: | 2019-06-19 |
公开(公告)号: | CN110117674B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 王晓波;万明月;张阴;王伟;邵文韬;程安东;李佳佳;付广辉;张玉坤;邱丽娟 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 刘海涵 |
地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大豆 植株 分枝 显著 相关 indel 标记 及其 应用 | ||
1.一种与大豆植株分枝数显著相关的InDel标记,其特征在于,所述InDel标记位于SEQID NO.7所示核苷酸序列的8-19位上,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1:TGTCTGTGAAGT。
2.权利要求1所述的InDel标记在鉴定大豆植株分枝数中的应用。
3.用于扩增权利要求1所述InDel标记的引物对,其特征在于,所述引物对的序列具体为:
1F:GCAAATCTGTCTGTGAAGTACG SEQ ID NO.2
1R:TATCCGAATTGCAAAAGCGCA SEQ ID NO.3。
4.权利要求3所述的引物对在鉴定大豆植株分枝数中的应用。
5.一种双引物对快速鉴定大豆植株分枝数多少的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
步骤1、设计鉴定待测大豆基因组DNA是否有缺陷的引物对
2F:GTGTCATTCCTGGCATACAAAAGT SEQ ID NO.4
2R:TAATGCCTCCTGCCCTGTTG SEQ ID NO.5
步骤2、提取待测大豆基因组DNA
步骤3、以SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5构成的引物对组,对步骤2提取的待测大豆基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;
步骤4、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,若扩增产物仅含1条主带,则对应待测大豆DNA没问题且植株分枝数多;若扩增产物包含两条主带,则对应待测大豆DNA没问题且植株分枝数少。
6.根据权利要求5所述的双引物对快速鉴定大豆植株分枝数多少的方法,其特征在于,步骤3中PCR扩增体系为:2.0μL 100ng/μL的模板DNA、10μM的引物各1.0μL,1.0U Primestar Max酶12.5μL,ddH2O 8.5μL;反应条件为:94℃变性2min,98℃变性10s,62℃,降落-0.2℃,退火15s,72℃延伸19s,共循环38次;最后72℃延伸8min,4℃保存。
7.含有权利要求3所述引物对的检测试剂或试剂盒。
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