[发明专利]一种与大豆植株分枝数显著相关的InDel标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201910529784.X 申请日: 2019-06-19
公开(公告)号: CN110117674B 公开(公告)日: 2022-07-19
发明(设计)人: 王晓波;万明月;张阴;王伟;邵文韬;程安东;李佳佳;付广辉;张玉坤;邱丽娟 申请(专利权)人: 安徽农业大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 安徽汇朴律师事务所 34116 代理人: 刘海涵
地址: 230036 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 大豆 植株 分枝 显著 相关 indel 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种与大豆植株分枝数显著相关的InDel标记,其特征在于,所述InDel标记位于SEQID NO.7所示核苷酸序列的8-19位上,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1:TGTCTGTGAAGT。

2.权利要求1所述的InDel标记在鉴定大豆植株分枝数中的应用。

3.用于扩增权利要求1所述InDel标记的引物对,其特征在于,所述引物对的序列具体为:

1F:GCAAATCTGTCTGTGAAGTACG SEQ ID NO.2

1R:TATCCGAATTGCAAAAGCGCA SEQ ID NO.3。

4.权利要求3所述的引物对在鉴定大豆植株分枝数中的应用。

5.一种双引物对快速鉴定大豆植株分枝数多少的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:

步骤1、设计鉴定待测大豆基因组DNA是否有缺陷的引物对

2F:GTGTCATTCCTGGCATACAAAAGT SEQ ID NO.4

2R:TAATGCCTCCTGCCCTGTTG SEQ ID NO.5

步骤2、提取待测大豆基因组DNA

步骤3、以SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5构成的引物对组,对步骤2提取的待测大豆基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;

步骤4、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,若扩增产物仅含1条主带,则对应待测大豆DNA没问题且植株分枝数多;若扩增产物包含两条主带,则对应待测大豆DNA没问题且植株分枝数少。

6.根据权利要求5所述的双引物对快速鉴定大豆植株分枝数多少的方法,其特征在于,步骤3中PCR扩增体系为:2.0μL 100ng/μL的模板DNA、10μM的引物各1.0μL,1.0U Primestar Max酶12.5μL,ddH2O 8.5μL;反应条件为:94℃变性2min,98℃变性10s,62℃,降落-0.2℃,退火15s,72℃延伸19s,共循环38次;最后72℃延伸8min,4℃保存。

7.含有权利要求3所述引物对的检测试剂或试剂盒。

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