[发明专利]交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法在审

专利信息
申请号: 201910535636.9 申请日: 2019-06-20
公开(公告)号: CN110184330A 公开(公告)日: 2019-08-30
发明(设计)人: 郑方媛;冯涛;李素芳;潘家荣;周秀雯;齐苗苗;朱天梦 申请(专利权)人: 中国计量大学
主分类号: C12Q1/6844 分类号: C12Q1/6844
代理公司: 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 代理人: 吴秉中
地址: 310018 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 同步检测 等温扩增反应 标记引物 交叉引物 反应管 分子诊断技术 现场快速检测 反应缓冲液 核酸试纸条 恒温水浴锅 食品安全 水浴反应 研究对象 引物系统 胶体金 甜菜碱 源DNA 扩增 引物 取出 物种 测试 参考 监管 配合 应用
【权利要求书】:

1.交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法,其特征在于包括以下步骤:

1)在反应管中加入基础CPA体系:Bst DNA 聚合酶反应缓冲液,甜菜碱,Mg2+BstDNA 聚合酶,ddH2O;一套CPA引物系统;不同肉源DNA;

2)反应管在63℃恒温水浴锅中扩增60 min后取出,外加各个肉源的特异性外加标记引物6s/a-n*(n=1,2,3...)后,93℃水浴反应3 min,取反应产物在胶体金核酸试纸条上测试。

2.如权利要求1所述的交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法,其特征在于所述步骤1)中CPA引物系统为:以不同肉源的相同基因片段设计的5条通用引物,包括一条交叉引物2a1s,两条内引物3a、2a,一对外围引物4s、5a,其中内引物3a、2a任一标记一条。

3.如权利要求1所述的交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法,其特征在于所述步骤2)中各个肉源的特异性外加标记引物6s/a-n*是依据待检测的不同肉源的特异性基因片段设计的外加标记检测引物。

4.如权利要求1所述的交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法,其特征在于所述步骤2)中胶体金核酸试纸条检测区域可设置与各个肉源的特异性外加标记引物6s/a-n*的不同外加标记结合的抗原/抗体以阻截不同肉源的产物,从而在不同检测线位置显现结果。

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