[发明专利]一种S．trachelii的LAMP检测引物、检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种S.trachelii的LAMP检测引物，其特征在于：由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成；各引物序列具体如下：

FIP：5′-GGCGCAATGTGCGTTCAAAGATGAACGCAGCGAAATGCGATA-3′；

BIP：5′-TTGGTATTCCATGGGGCATGCCGCGAGACAAACACCCAACA-3′；

F3：5′-TCTCTTGGTTCTGGCATCGA-3′；

B3：5′-TCGTTTTGAGGCGAGTCTG-3′；

LF：5′-CACTGAATTCTGCAATTCACACTAC-3′；

LB：5′-TGTTCGAGCGTCATTTGTACC-3′。

2.权利要求1所述的LAMP检测引物在检测S.trachelii中的应用。

3.一种S.trachelii的LAMP检测试剂盒，其特征在于：至少包括引物溶液和LAMP反应液；其中，引物溶液中的引物为正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成，各引物序列具体如下：

FIP：5′-GGCGCAATGTGCGTTCAAAGATGAACGCAGCGAAATGCGATA-3′；

BIP：5′-TTGGTATTCCATGGGGCATGCCGCGAGACAAACACCCAACA-3′；

F3：5′-TCTCTTGGTTCTGGCATCGA-3′；

B3：5′-TCGTTTTGAGGCGAGTCTG-3′；

LF：5′-CACTGAATTCTGCAATTCACACTAC-3′；

LB：5′-TGTTCGAGCGTCATTTGTACC-3′。

4.根据权利要求3所述的S.trachelii的LAMP检测试剂盒，其特征在于：所述的LAMP反应液含有10×ThermoPol Buffer、MgSO₄、甜菜碱、dNTPs、Bst聚合酶和显色剂HNB。

5.权利要求3所述的S.trachelii的LAMP检测试剂盒在检测S.trachelii中的应用。

6.一种检测S.trachelii的方法，其特征在于：提取待检菌株的DNA，以提取的DNA为模板，利用权利要求1所述的LAMP检测引物或权利要求3所述的LAMP检测试剂盒进行LAMP；观察LAMP反应溶液颜色变化，天蓝色表示检测为阳性，存在S.trachelii；紫色表示检测结果为阴性，不存在S.trachelii。