[发明专利]一种植物乳杆菌液体发酵培养基及其培养方法和应用

说明书

本发明公开一种植物乳杆菌液体发酵培养基，其配方成分如下：葡萄糖20‑30g/L、豆粕粉10‑15g/L、酿酒酵母提取物5‑10g/L、磷酸氢二钾2‑5g/L、氯化铵5‑10g/L、氯化钠3‑6g/L、碳酸钙5‑10g/L、硫酸镁0.2‑0.5g/L、硫酸锰0.02‑0.05g/L。还公开了一种植物乳杆菌液体发酵的培养方法，以及此发酵培养基在凝结芽孢杆菌液体发酵的培养方法中的应用。本发明采用一水葡萄糖、豆粕、酿酒酵母提取物及其氯化铵为原料，同时优化培养基组成分，简化发酵操作技术方法，使植物乳杆菌活菌数明显提高的同时，降低生产成本及简化生产工艺。

技术领域

本发明属于乳酸菌培养发酵技术领域，涉及一种植物乳杆菌液体发酵培养基及其培养方法，和发酵培养基的应用。

背景技术

植物乳杆菌作为乳酸菌的一种，为厌氧或兼性厌氧的革兰氏阳性菌。植物乳杆菌在动物肠道作为益生菌，能产生有机酸、细菌素等天然抑菌物质，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等病原菌生长，改善肠道健康。同时植物乳杆菌能有效降解水体有机物、氨氮与亚硝酸盐等有害物质，现广泛应用于动物饲料添加剂与水环境修复剂中。

实验室中乳酸菌的培养一般采用MRS培养基，该培养基能使乳酸菌快速生长繁殖，但由于该培养基成本较高，不适合工业化大规模生产。国内对植物乳杆菌培养基的研究中，发现葡萄糖作为速效碳源培养植物乳杆菌时，其活菌数较高，列为最适合菌体生长的速效碳源之一。多数的乳酸菌发酵培养基的优化改良基于MRS培养基的基础上，如李职等利用葡萄糖作为碳源优化MRS培养基培养植物乳杆菌(CN201510209378.7，一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方法)，其发酵培养基成本约为843元/吨，比MRS培养基降低2000元/吨；王劲松等利用葡萄糖作为碳源优化MRS培养基培养植物乳杆菌(CN201510120735.2，一种饲用植物乳杆菌高密度发酵培养基及方法)活菌数比MRS培养基提高30倍，但发酵过程需要补加葡萄糖，控制pH值，且成本与MRS培养基相差不大。李周勇等利用马铃薯汁、玉米浸出汁、蔗糖以及乳清粉添加进入MRS培养基，且重新调整各组分用量来培养植物乳杆菌，其活菌数比MRS培养基高出一个数量级，但成本却比MRS培养基高。

因此，基于现有技术，本发明也是以MRS培养基为基础对照，通过筛选廉价原料对MRS培养基进行优化改良，在提高植物乳杆菌活菌数的前提下，大大降低生产成本。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌液体发酵培养基及其培养方法，以解决生产成本过高与发酵技术工艺流程复杂的问题。

为了达成上述目的，本发明的解决方案是：

一种植物乳杆菌液体发酵培养基，其配方成分如下：葡萄糖20-30g/L、豆粕粉10-15g/L、酿酒酵母提取物5-10g/L、磷酸氢二钾2-5g/L、氯化铵5-10g/L、氯化钠3-6g/L、碳酸钙5-10g/L、硫酸镁0.2-0.5g/L、硫酸锰0.02-0.05g/L。

优选地，所述一种植物乳杆菌液体发酵培养基中，葡萄糖为一水葡萄糖，豆粕粉为粗豆粕经过超微粉碎。

优选地，所述一种植物乳杆菌液体发酵培养基中，培养基采用氢氧化钠调节pH值为6.5-7.5，并于在110-115℃灭菌20-30min。

优选地，所述一种植物乳杆菌液体发酵培养基中，培养基含碳酸钙5-10g/L，起到中和植物乳杆菌发酵过程中产生的有机酸，能有效减缓发酵液pH值快速下降，维持菌体较适宜的生长pH值。

一种植物乳杆菌液体发酵的培养方法，包括以下步骤：

以植物乳杆菌为发酵菌株，以MRS培养基作为菌株斜面活化与摇瓶种子液培养基，通过斜面活化、摇瓶种子液培养后，以5％-10％的接种量接入10L发酵罐的发酵液中，厌氧发酵培养，10L发酵罐的发酵液配方为前述植物乳杆菌液体发酵培养基。