[发明专利]从沙棘提取物中分离和制备三萜化合物的方法

权利要求书

1.一种式I所示化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将沙棘浸膏上硅胶柱，依次以石油醚，石油醚与乙酸乙酯混合比例为9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8，1:9为流动相进行洗脱，洗脱过程中通过薄层色谱分析确定石油醚:乙酸乙酯为7:3时的馏分为三萜化合物含量最高的馏分，收集洗脱液；

（2）将步骤（1）所得洗脱液依次进行液相正相液相色谱分析、正相色谱制备、反相液相色谱分析和反相色谱制备，最后进行液相色谱分析纯度，获得所述式I化合物；

步骤（1）中，所述沙棘浸膏采用95%乙醇对沙棘进行提取得到；

步骤（2）中，正相液相色谱分析条件为：

色谱柱：亲水HILIC色谱柱；流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2%~4%的A，98%~96%的B；检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；

所述正相色谱制备条件为：

色谱柱：HILIC色谱柱；流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2%~4%A，98%~96%B；检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；

正相色谱制备后，收集保留时间为14~19min对应的组分，进行下反相液相色谱分析分析，色谱条件为：

色谱柱：C18色谱柱，流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20%~30% A，80%~70%的B；检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；

反相制备色谱条件为：

色谱柱：C18色谱柱，流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20%~30% A，80%~70%的B；检测波长：203±10nm；柱温：30±5℃；

将制备后的溶液浓缩进行液相分析，若纯度大于98%，获得目标化合物；若纯度小于98%，则再进行色谱制备，液相色谱分析的色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；流动相：A为水，B为乙腈，等度洗脱条件：20%~30% A，80%~70%的B。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤（2）正相液相色谱分析条件为：

色谱柱规格为4.6mm*250mm，5μm；流速：1±0.5mL/min；进样量：。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述正相色谱制备条件为：

色谱柱规格为20mm*250mm，5μm；流速：19±2mL/min；进样量：1±0.5mL。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，正相色谱制备后的反相液相色谱分析的色谱条件为：

色谱柱规格为4.6mm*250mm，5μm；流速：1±0.5mL/min。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，反相制备色谱条件为：

色谱柱规格为21.2mm*250mm，5μm；流速：21±2mL/min。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，制备后的溶液浓缩进行液相分析所用色谱柱规格为4.6 mm×250 mm，5μm。

7.根据权利要求1~6任意一项所述方法，其特征在于，步骤（1）中所述沙棘浸膏的提取操作：将沙棘果渣与乙醇按照料液比为1：10~30 kg/L混合在70~80℃下提取，每次提取1.5~2.5h，提取3~4次，合并提取液除去溶剂得到浸膏。