[发明专利]从沙棘提取物中分离和制备三萜化合物的方法

说明书

本发明提供式一种化合物的色谱制备方法，包括将沙棘制成沙棘浸膏，将浸膏与硅胶进行拌样后装柱，以石油醚，以及不同体积比例混合的石油醚和乙酸乙酯的混合液为流动相进行冲柱；将步骤(1)所得馏分依次进行液相色谱分析、正相色谱制备、液相色谱分析和反相色谱制备，最后进行液相色谱分析纯度。本发明首次从沙棘提取物中提取制备出化合物，其具有α‑葡萄糖苷酶抑制效果，可在制备降血糖相关产品中应用。

技术领域

本发明涉及沙棘中有效物质的提取领域，特别是涉及从沙棘提取物中分离和制备三萜化合物的方法。

背景技术

沙棘(拉丁学名：Hippophae rhamnoides Linn.)，是一种胡颓子科、沙棘属落叶性灌木，其特性是耐旱、抗风沙，可以在盐碱化土地上生存，因此被广泛用于水土保持。中国西北部大量种植沙棘，用于沙漠绿化。

沙棘果实营养丰富，据测定其果实中含有多种维生素、脂肪酸、微量元素、亚油素、沙棘黄酮、超氧化物等活性物质和人体所需的各种氨基酸。其中维生素C含量极高，每100克果汁中，维生素C含量可达到825～1100毫克，是猕猴桃的2～3倍，素有维生素C之王的美称。现被广泛应用于沙棘果汁、沙棘原浆液的生产，在生产过程中，需要去皮，去掉的沙棘果皮往往当作废料丢弃，或生产成干粉当作饲料，价格非常低廉。

现在已经被报道过沙棘果皮中含有熊果酸和齐墩果酸这两个三萜酸，具有保肝护肝、降低血糖和抗皮肤氧化等功效，还有望在沙棘中检测出更多的有效物质，利于对沙棘的科学开发利用。

发明内容

本发明的目的在于提供式I所示化合物的制备方法，

包括以下步骤：

(1)将沙棘浸膏上硅胶柱，以石油醚以及不同体积比例混合的石油醚和乙酸乙酯的混合液为流动相进行洗脱，其中石油醚与乙酸乙酯混合比例为(9～1)：(1～9)，收集三萜化合物洗脱液；

(2)将步骤(1)所得洗脱液依次进行液相正相色谱分析、正相色谱制备、反相液相色谱分析和反相色谱制备，最后进行液相色谱分析纯度，获得所述式I化合物。

进一步地，步骤(2)包括以下内容：

将步骤(1)所得馏分进行正相液相色谱分析，色谱条件包括：

色谱柱：亲水HILIC色谱柱；优选为规格为4.6mm*250mm，5μm，更有选为XAmide4.6mm*250mm，5μm色谱柱；

流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2％～4％A，98％～96％B；

优选地，还包括以下条件中的至少一种：

检测波长：203±10nm；优选为203±5nm；

柱温：30±5℃；优选为30±2℃；

流速：1±0.5mL/min；优选为1±0.2mL/min；

进样量：10±5μL；优选为10±2μL；

进一步地，所述正相色谱制备条件包括：

色谱柱：HILIC色谱柱；优选规格为20mm*250mm，5μm；更优选为XAmide20mm*250mm，5μm色谱柱；

流动相：A为乙醇，B为正己烷；等度洗脱条件：2％～4％A，98％～96％B；

优选地，还包括以下制备色谱条件中的至少一种：

检测波长：203±10nm；优选为203±5nm

柱温：30±5℃；优选为30±2℃

流速：19±2mL/min；优选为19±1mL/min；