[发明专利]一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法

权利要求书

1.一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法，其特征在于包括以下步骤：

1)种鲍的选择及促熟：取个体活力良好且无外部损伤的皱纹盘鲍作为种鲍，按雌雄分别放置于亲鲍培育池中促熟；

2)人工催产：采用阴干结合紫外线照射海水的方法对性腺发育成熟的个体进行催产，直至雌雄种鲍产卵和排精为止；所述阴干的方法是阴干60～120min后，将雌雄个体严格区分置于标记清楚的不同容器中，注入照射强度为500～1200mWh/L紫外线处理海水，每隔60min更换一次直至配子排放，期间注意防止意外受精；

3)配子的选择和处理：使用150μm的筛绢滤除步骤2)配子中的杂质，镜检确定卵子质量和精子活力；所述镜检是指镜检质量高的卵液中卵子应卵膜完整、形状规则且不存在意外受精，活力好的精子应活动性和分散度良好；

4)同步受精；将步骤3)中确定的活力好和质量高的精子和卵子充分均匀混合，分为处理组和对照组；所述精子与卵子的质量比为(10～7)︰1；所述受精的温度为18～23℃，盐度为30～35；

5)药物诱导：观察对照组受精卵，第一极体出现比例为50％～80％时，将处理组内受精卵加入至浓度为1.50～1.75mg/L的CB诱导液中处理15～20min或30～40mg/L的6-DMAP诱导液中处理10～15min；

6)药物去除及孵化后，即获得皱纹盘鲍三倍体。

2.如权利要求1所述一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法，其特征在于在步骤1)中，所述皱纹盘鲍种鲍为2～3龄，壳长为70～130mm；所述亲鲍培育池内性别特征必须单一，雌性鲍鱼性腺为墨绿色，雄性鲍鱼性腺为奶白色。

3.如权利要求1所述一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法，其特征在于在步骤5)中，所述第一极体的观察应时时取样置于显微镜下观测；所述CB诱导液为CB溶于DMSO所配制的1mg/mL的储存液稀释获得，所述6-DMAP诱导液为6-DMAP溶于DMSO所配制的50mg/mL的储存液稀释获得。

4.如权利要求1所述一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法，其特征在于在步骤6)中，所述药物去除的具体方法为：药物处理后将受精卵置于1％的二甲基亚砜中清洗2次，每次15min。

5.如权利要求1所述一种皱纹盘鲍三倍体的诱导方法，其特征在于在步骤6)中，所述孵化按照常规孵化及后期培育方法进行，使用流式细胞仪确定面盘幼虫三倍体率。