[发明专利]一种改进的高活性耐热的肌酸水解酶及其应用有效
| 申请号： | 201910551197.0 | 申请日： | 2019-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN110257359B | 公开（公告）日： | 2020-07-14 |
| 发明（设计）人： | 雷洁;戴俊 | 申请（专利权）人： | 湖南艾科瑞生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/78 | 分类号： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳市恒程创新知识产权代理有限公司 44542 | 代理人： | 赵爱蓉 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市岳麓区学士街道*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改进 活性 耐热 水解 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一个改进的肌酸水解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.一种分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸选自：
(1) SEQ ID NO：3所示的多核苷酸；和
(2)与（1)所述的多核苷酸互补的多核苷酸。
3.一种载体，其包含SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。
4.如权利要求3所述的载体，其特征在于载体为PUC系列，pET系列，或pGEX中的任—种。
5.一种宿主细胞，其含有权利要求3或4所述的载体。
6.如权利要求5所述的宿主细胞，包括:细菌和酵母。
7.一种发酵生产重组肌酸水解酶的方法：从甘油管中按0.4％的接种量将权利要求5或6所述的宿主细胞接入20mL/250mL三角瓶，回旋式摇床转速200rpm，培养温度为37℃，培养12h，发酵培养：将培养好的种子培养液按1％(v/v)的接种量接种至50mL/500mL三角瓶中进行培养，培养温度为37℃，摇床转速200rpm；待OD600＝0.6，加入终浓度为0.6mmol/L 的IPTG诱导表达，培养10h。
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