[发明专利]一种发酵生产茴香霉素的方法及培养基

权利要求书

1.一种发酵法生产茴香霉素的方法，其特征在于，所述方法包括：

a.菌种斜面培养，制备孢子悬液：

将梯度稀释后的所述菌种涂布于含孢子培养基的平板上，挑取所述平板上的单菌落接种于含孢子培养基的斜面上，待孢子成熟丰满后加无菌水制备含菌种孢子的孢子悬液；所述菌种为冻干管保藏的浅灰色链霉菌ATCC11796型菌种；含孢子培养基的所述平板和所述斜面的培养温度均为28～30℃、培养时间均为6～7天；其中，所述孢子培养基由以下组分制成：可溶性淀粉15～25g/L、黄豆饼粉25～35g/L、轻质碳酸钙5～15g/L、七水硫酸镁2.5～7.5g/L和琼脂粉15～25g/L；所述孢子培养基的pH为7.0～7.5；

b.进行菌种摇瓶种子培养，制备摇瓶种子液：

将所述孢子悬液接入摇瓶种子培养基中；

在温度28～30℃、摇床转速为200～250rpm的条件下培养20～24小时，得摇瓶种子培养液；所述摇瓶种子培养基由以下组分制成：葡萄糖5～10g/L、酵母粉5～10g/L、玉米浆干粉10～20g/L和硫酸镁5g/L；所述摇瓶种子培养基的pH为7.3；

c.将所述摇瓶种子液接入种子罐培养基中，制备种子罐种子液：

将所述摇瓶种子液转接至装有无菌种子罐培养基中，在温度为28～30℃、搅拌转速为250～350rpm、通气量为40～80m³/h、罐压为40～60KPa的条件下培养20～24小时，制得种子罐种子液；所述种子罐内部的种子培养物质的体积占所述种子罐体积的60％～80％，所述摇瓶种子液按所述种子罐培养基体积的0.75～1.5‰接种量接种至所述种子罐培养基中；所述种子罐培养基由以下组分制成：葡萄糖10g/L、酵母粉10g/L、玉米浆干粉20g/L、硫酸镁5g/L；或者葡萄糖10g/L、酵母粉10g/L、玉米浆干粉20g/L、硫酸镁5g/L和聚醚消泡剂2g/L；所述种子培养基pH为7.5，所述种子培养基放置于种子罐中；

d.对所述种子罐种子液进行发酵培养：

将所述种子罐种子液接种至装有无菌发酵培养基的发酵罐中，在温度为28～30℃、搅拌转速为100～200rpm、通气量为150～300m³/h、罐压为40～60KPa、pH为6.0～8.0的条件下发酵培养30～36小时，制得含茴香霉素的发酵液；所述发酵培养还包括通过补加生理碱性物质控制所述发酵罐内发酵液pH：在发酵前10～15小时，不对所述发酵罐内的发酵液pH进行控制；发酵过程中所述发酵罐内发酵液的pH逐渐下降，当所述发酵罐内发酵液pH低于6.0时，通过流加生理碱性物质控制发酵液pH在6.0～6.5；发酵后期停止流加生理碱性物质；所述发酵培养基由以下组分制成：甘油15～25g/L、黄豆粉20～40g/L、硫酸镁2.5～7.5g/L、硫酸锰2.5～7.5g/L和聚乙二醇5～10g/L；所述发酵培养基pH为7.0～7.5，所述发酵培养基放置于发酵罐中；所述发酵培养基的体积占所述发酵罐体积的60％～80％，所述种子罐种子液按所述发酵培养基体积的5～10％接种量接种于所述发酵罐中。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生理碱性物质为氨水。