[发明专利]一种平鲉鱼类性别特异分子标记引物、鉴别方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201910552090.8 申请日: 2019-06-25
公开(公告)号: CN110172520B 公开(公告)日: 2020-06-05
发明(设计)人: 贺艳;齐洁;张全启;李雪梅;宋伟豪 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888
代理公司: 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 代理人: 彭友谊
地址: 266100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 鱼类 性别 特异 分子 标记 引物 鉴别方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种平鲉鱼类性别特异分子标记引物,其特征在于所述的引物序列如下所示:Tag-fw5′-primer:5′-GTAAACCAAGAACTGAGGAGGAG-3′,Tag-rv3′-primer:5′-GAGAAAAGCAGAAGTGGAATCA-3′。

2.一种利用权利要求1所述引物进行许氏平鲉雌雄鉴别的方法,所述方法运用PCR扩增技术在雌雄个体的基因组DNA中扩增出特异性片段;

所述PCR反应体系如下:20ng/μL DNA模板1.0μL,10×Taq buffer2.5μL,浓度2.5mMdNTP2.0μL,10mM Fw/Rv引物各0.5μL,5 U/μL Taq酶0.25μL,dd H2O补齐25.0μL;

所述PCR反应程序如下:95℃预变性5min,95℃变性30sec,55℃退火30sec,72℃延伸90sec,循环30次,72℃延伸10min;待PCR反应结束后琼脂糖凝胶进行电泳,特异性片段大小为558bp,仅在雄性个体中有扩增。

3.权利要求2所述方法在平鲉鱼类雌雄鉴别中的应用。

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