[发明专利]一种负载KHS101嘧啶二胺类小分子白蛋白纳米颗粒及其制备方法

说明书

本发明公开一种负载KHS101嘧啶二胺类小分子白蛋白纳米颗粒及其制备方法，该方法包括：利用白蛋白为原料，通过调整包载的KHS101的浓度比例及溶剂，以及优选反应时间，搅拌速度，戊二醛的浓度与比例充分控制颗粒粒径的大小，制备出粒径在50～150纳米的颗粒，测试该纳米粒子的稳定性。本发明制备出的颗粒减少有机溶剂的毒副作用并减少药物的全身分布。

技术领域

本发明涉及纳米医药技术领域，更具体的是涉及一种负载KHS101嘧啶二胺类小分子白蛋白纳米颗粒及其制备方法。

背景技术

自从紫杉醇发现以来，以抗有丝分裂为手段的肿瘤治疗药物日益受到重视，随着紫杉醇成功应用于临床治疗，人们开始对探素新颖的抗有丝分裂药物产生了更加浓厚的兴趣。TACC(Transforming acidic coiled coil3)是一种中心体蛋白，它在细胞有丝分裂过程中发挥着十分重要的作用。许多研究证据表明，TACC 3蛋白与癌症有着密切的联系，在许多癌组织细胞系中都检測到了TACC 3的异常表达，而这种异常表达有可能是导致该组织肿瘤发生的重要原因，通过抑制TACC 3蛋白的活性可能会得到治疗癌症的目的，TACC3本身也可能会成为一类新型的肿痛治疗靶标。

虽然TACC 3蛋白与癌症有着千丝万缕的联系，但是目前还没有任何一种关于TACC3蛋白的抑制剂被证明可以有效的治疗癌症或者对癌细胞存在抑制作用。所以，关于TACC3蛋白小分子抑制剂在癌症治疗中的研究就显得十分必要。有报道一种KHS101的小分子化合物，可以通过对TACC3蛋白的特异的抑制作用促进大鼠的神经元分化。

KHS101有着潜在的抗肿瘤活性，表现出了一定的抗肿瘤细胞增殖及迁移的作用。KHS101是以直接或间接的机制扰乱ARNT/TACC3复合物。KHS101处理导致细胞中蛋白酶体介导的TACC3蛋白的降解增加，可以想象为是通过ARNT结合基序之外的相互作用介导。有报道指出，KHS101抑制HIF靶基因表达并降低HIF-1α蛋白水平。KHS101降低p-AKT，p-GSK3β和β-catenin的表达，以及下游标志物c-Myc和cyclin D1的表达。KHS101还能够抑制细胞生长，运动，上皮-间质转化(EMT)和乳腺癌干细胞，同时诱导细胞凋亡。KHS101改变多种生物过程和信号通路，并显着降低有丝分裂激酶Aurora A和Polo样激酶1(PLK1)的表达。

KHS101是一种嘧啶二胺类小分子化合物，嘧啶胺类化合物、药物家族十分庞大，多数疾病治疗药物中都有这类药物的身影，然而，许多嘧啶胺类药物在临床前实验和临床实验中都表现出了不同程度的药物毒性并会在临床应用中引发不同的副作用。另外KHS101溶解于疏水性溶剂中，大多为有机溶剂，有机溶剂在用药时也存在毒副作用。

近年来，纳米药物输送体系小分子药物在体内运输的良好介质，可以减少有机溶剂的毒副作用并减少药物的全身分布，已成为肿瘤治疗的研究热点。纳米药物颗粒是指粒径在10～1000纳米的颗粒,它可以将药物或者其他功能性分子包裹在纳米颗粒之中或修饰在其表面，并将其运输到目的部位。与传统小分子化疗药物相比，纳米药物载体能显著提高负载药物的肿瘤传输效率并降低药物的副作用。纳米药物载体之所以能够向肿瘤和正常组织差异性的输送治疗药物，是基于其对肿瘤组织的高渗透性和滞留效应(EPR effect)。由于肿瘤周围血管异常和淋巴回流缺失，纳米药物载体可穿透肿瘤组织并在特定部位释放药物，从而减少对正常组织的损伤，减少副作用。因此，选用纳米颗粒负载嘧啶二胺类小分子药物能够极大的使KHS101发挥抗癌效果，并降低毒性另外可以实现长时间循环并缓慢释放药物等优点。但是目前并没有关于负载KHS101这种化合物小分子的的纳米颗粒的研究报道。

白蛋白纳米颗粒作为一种绿色可降解的安全性较好纳米颗粒，可用于负载疏水性药物。将白蛋白水溶液与溶解药物的油性溶剂高速搅拌混合形成乳液，之后加入戊二醛进行交联，最终旋转蒸发除去油相得到稳定的纳米粒。这种方法可以大量连续生产载药的白蛋白纳米颗粒。制备完成的白蛋白纳米颗粒具备可生物降解、制备容易且可重复性好等特点。