[发明专利]一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法

权利要求书

1.一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）外植体灭菌：采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，用称量纸分装包成小纸包，放置在超净工作台上，用无菌GA₃ 溶液浸泡，后用75%酒精和0.1%升汞灭菌，无菌水冲洗；

（2）启动培养：将步骤（1）中灭菌后的孢子接种到启动培养基中，培养室中培养4~7周后，孢子萌发变绿，所述的启动培养基成分为MS、6-BA 1.5mg/L 、NAA 0.2mg/L 、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃;

（3）增殖培养：将步骤（2）中萌发变绿的孢子接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周后，丛生芽生成，待丛生芽株高达到1～3cm可进行下一步操作，所述的增殖培养基成分为MS、6-BA 0.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃;

（4）生根培养：选取步骤（3）中生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中，培养室中培养，培养时间为3～5周,得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗，所述的生根培养基成分为1/2MS、IBA 0.2mg/L、蔗糖20g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃;

（5）炼苗移栽：将步骤（4）中生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床基质中培植。

2.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤（1）中无菌GA₃ 溶液浸泡时间为5min；75%酒精灭菌时间为40～60s；0.1%升汞灭菌时间为6～8min，无菌水冲洗次数为4～6次。

3.如权利要求1所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法，其特征在于：所述步骤（5）中大棚内温度为18～25℃；苗床基质为腐殖质混合珍珠岩，混合比例2:1。

4.如权利要求1~3任一项所述的二歧鹿角蕨的组培快繁方法在二歧鹿角蕨繁殖栽培技术领域中的应用。