[发明专利]一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。该方法主要包括如下步骤：首先采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，并灭菌。将灭菌后的孢子接种到启动培养基中培养，待孢子萌发变绿后接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周，丛生芽生成，选取生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中，在培养室内培养3～5周，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗。将生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中培植。该方法中组培所用培养基配方简单，组培流程简便，组培时间缩短，繁殖系数高，成活率高，可为二岐鹿角蕨工厂化育苗及其深加工提供技术支持。

技术领域

本发明属于二歧鹿角蕨繁殖栽培技术领域，尤其涉及一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。

背景技术

二歧鹿角蕨（学名：Platycerium bifurcatum (Cav.) C. Chr.）为鹿角蕨科鹿角蕨属下的一个种。叶丛生，下垂，顶端分叉呈凹状深裂，形如“鹿角”，故名。株高40~50cm。叶有营养叶(不育叶、裸叶)和孢子叶(育叶、实叶)两种。不育叶圆形而凸出，边缘波状，新叶绿白色，老叶棕色。主要功能除了抓住支承物之外，还可收集从树上掉下来的碎屑，把它分解成养分，并包裹存根周围，保护蕨根和贮蓄水分。育叶丛生，灰绿色。分叉成窄裂片。孢子囊在凹处下开始上延至裂片的顶端。

二歧鹿角蕨株形奇异，姿态优美，在厅室的阴暗无光处也可生长。它是观赏蕨中姿态最奇特的一类，属附生性观赏蕨。鹿角蕨可布置于公园、植物园、商店、居室、窗台等地方的装饰，贴生于古老枯木或装饰于吊盆，作悬吊式或镶挂式布置，是室内立体绿化的好材料。

目前，二歧鹿角蕨主要通过分株和孢子繁殖，但成活率都不是很高，远不能满足市场的需求。通过组织培养技术进行繁殖，能有效提高其繁殖系数，目前虽有一些对二岐鹿角蕨的研究报道，如专利CN101133704A，但过程大都复杂，组培耗时28周以上，耗时耗力，可操作性不强。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法。

为达上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种二歧鹿角蕨的组培快繁方法，包括如下步骤：

（1）外植体灭菌：采集生长健壮无病虫害的二岐鹿角蕨叶被的成熟孢子，用称量纸分装包成小纸包，放置在超净工作台上，用无菌GA₃ 溶液浸泡，后用75%酒精和0.1%升汞灭菌，无菌水冲洗；

（2）启动培养：将步骤（1）中灭菌后的孢子接种到启动培养基中，培养4~7周后，孢子萌发变绿；

（3）增殖培养：将步骤（2）中萌发变绿的孢子接种到增殖培养基中，在培养室内培养4～6周后，丛生芽生成，待其达到一定株高可进行下一步操作；

（4）生根培养：选取步骤（3）中生长健壮的丛生芽，将其切成单芽转接到生根培养基中培养，得到生根的二岐鹿角蕨无菌苗；

（5）炼苗移栽：将步骤（4）中生长健壮的二岐鹿角蕨无菌苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床基质中培植。

进一步的，所述步骤（1）中无菌GA₃ 溶液浸泡时间为5min；75%酒精灭菌时间为40～60s；0.1%升汞灭菌时间为6～8min，无菌水冲洗次数为4～6次。

进一步的，所述步骤（2）中培养时间为4~7周；培养室内培养条件为：光照强度2000～3000LX，光照时间12～16h/d，温度20～24℃。

进一步的，所述步骤（2）中启动培养基成分为MS、6-BA 1.5mg/L 、NAA 0.2mg/L 、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L，pH 5.8～6.2。