[发明专利]一种软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法

权利要求书

1.一种软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

步骤a.采集软枣猕猴桃小孢子发育处于单核期的花蕾，低温湿润条件下保存20-30h；

步骤b.将经过低温保存后的花蕾进行消毒处理；

步骤c.分离花粉；

步骤d.将分离得到的花粉接种于愈伤组织诱导培养基中，暗培养10-15d；

步骤e.待步骤d中暗培养后的花粉形成肉眼可见的胚后，继续暗培养至胚发育成成熟胚，再在植株分化培养基上培养40-50d，最后转移到生根培养基上培养生根，即完成软枣猕猴桃单倍体植株的培育。

2.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤a中，采集软枣猕猴桃花粉处于单核靠边期的花蕾。

3.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤a中所述低温为1-5℃，所述保存时间为24h。

4.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤b中所述消毒处理过程为：先用质量分数为70-75％乙醇溶液浸润花蕾20-40s，再在饱和漂白粉溶液中浸泡10-20min，之后用无菌水漂洗3-5次。

5.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤c中所述分离花粉的方法为：剥离花药，将花药在无菌条件下插接到无菌MS固体培养基上，当花药自动裂开，移开花药，收集花粉。

6.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基的组分为：MS培养基+2mg/L2,4-二氯苯氧乙酸+1mg/L KT+0.5-1.5mg/L玉米汁。

7.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤d中所述暗培养温度为30-35℃。

8.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤e中所述暗培养条件为：25℃振荡培养7-10d，振荡频率为60-100r/min。

9.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤e中所述植株分化培养基的组分为：MS培养基+0.01mg/L GA₃+150-200g/L香蕉泥，在所述植株分化培养基上培养的具体方法为：于20℃、16h光培养及8h暗培养交替、2000LUX光强条件下进行培养。

10.根据权利要求1所述的软枣猕猴桃单倍体植株的培育方法，其特征在于，步骤e中所述生根培养基的组分为：1/2MS+0.1mg/L IBA+0.2g/L活性炭。