[发明专利]硅基探针材料、硅基探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种硅基探针材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵进行羟基化处理得到羟基化硅球；

b)羟基化硅球进行氨基化处理得到氨基化硅球；

c)氨基化硅球进行羰基化处理得到羰基化硅球；

d)羰基化硅球引入PEG得到硅基探针材料。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述1)中的羟基化包括：十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵，与正硅酸乙酯在75-85℃温度下反应，得到羟基化硅球；

优选地，十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵，与正硅酸乙酯的反应摩尔比为1：(7-9)；

优选地，所述反应时间为1.5-2.5小时；

优选地，所述反应后还依次包括固液分离、洗涤和冻干的步骤；

优选地，所述洗涤依次包括纯水洗涤和无水乙醇洗涤。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述2)氨基化包括：羟基化硅球与3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液反应，得到氨基化硅球；

优选地，3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液的浓度为4-6％(v/v)；

优选地，3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液的溶剂为低碳醇；

优选地，所述低碳醇包括甲醇、乙醇或丙醇；

优选地，所述反应的时间为1.5-2.5小时；

优选地，所述反应后还包括洗涤和干燥的步骤；

优选地，所述洗涤为乙醇洗涤；

优选地，所述干燥为100-120℃条件下干燥10-14h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述3)羰基化包括：氨基化硅球与戊二醛溶液在还原剂存在条件下反应，得到羰基化硅球；

优选地，戊二醛溶液的浓度为3-5％(v/v)；

优选地，戊二醛溶液的溶剂包括PBS、TBS或醋酸盐缓冲液；

优选地，所述还原剂包括氰基硼氢化钠，浓度为45-55mmol/L；

优选地，所述反应的时间为1.5-2.5小时；

优选地，所述反应后还包括洗涤的步骤；

优选地，所述洗涤为PBS洗涤。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述4)引入PEG包括：羰基化硅球与氨基聚乙二醇羧基溶液在还原剂存在条件下反应，得到硅基探针材料；

优选地，氨基聚乙二醇羧基溶液的浓度为450-550mmol/L；

优选地，氨基聚乙二醇羧基溶液的溶剂包括PBS；

优选地，所述还原剂包括氰基硼氢化钠，浓度为45-55mmol/L；

优选地，所述反应的时间为10-14小时；

优选地，所述反应后还包括洗涤和冻干的步骤；

优选地，所述洗涤依次包括PBS洗涤和纯水洗涤。

6.权利要求1-5任一项所述的制备方法制备得到的硅基探针材料。

7.一种硅基探针，其特征在于，包括权利要求6所述的硅基探针材料和修饰于所述硅基探针材料表面的适配子。

8.根据权利要求7所述的硅基探针，其特征在于，所述适配子序列包括如下a)-c)中的任意一种：

(a)HPN CP-19-3：

5’-TTTTTCCGCGCTCAGTTTTGCATAGATTTGCACATTAATATATGCGCGGGCG-3’(SEQ ID NO.1)；

(b)HPN CP-134-5：

5’-TTTTTCCGCGCCCCCTCTGGTCAACCAGTCACATTAATATATGCGCGGGCG-3’(SEQ ID NO.2)；

(c)HPN CP-186-5：

5’-TTTTTCCGCGCAGCCCAAAAGGAGAATTCTTTGTTAATATATGCGCGGGCG-3’(SEQ ID NO.3)。