[发明专利]硅基探针材料、硅基探针及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物材料技术领域，具体而言，提供了一种硅基探针材料、硅基探针及其制备方法和应用。硅基探针材料的制备方法包括将十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵依次经过羟基化、氨基化、羰基化和引入PEG反应，得到硅基探针材料。该方法提供了一种全新的硅基探针材料的制备方法，简单、重现性好、得到的材料稳定均一。将适配子修饰于硅基探针材料上即可得到硅基探针，通过采用不同的适配子，制备的硅基探针可以应用于各种目标微小RNA特异性的定量检测，并且实现体液原位检测。

技术领域

本发明涉及生物材料技术领域，具体而言，涉及一种硅基探针材料、硅基探针及其制备方法和应用。

背景技术

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类广泛存在于真核生物、长度为21-25nt的非蛋白质编码小RNA，它们能以序列特异性方式调节基因表达，在发育、凋亡、代谢以及人类疾病方面都起着不容忽视的作用。miRNA的生理病理调控机制是近几年来受到高度重视的一门新型学科。

以心血管疾病为例，心血管疾病是导致人类死亡的第一杀手，主要有冠心病、高血压、风湿性心脏病、心肌炎等，在这些疾病发生发展过程中均会发生心肌损伤，心肌损伤是心室结构重塑、心律失常、心力衰竭、心源性猝死的发病基础。如何有效诊断和预防心肌损伤、心肌梗死是目前医学和生物学研究亟待解决的问题。近年来的研究表明，心血管疾病会导致体内特殊的微小RNA的表达量发生明显的变化，因此，通过检测体液中的特定微小RNA的变化即可起到诊断、预防心血管疾病的作用。目前比较常用的用来统计微小RNA变化的手段是借助于实时定量PCR的技术。虽然实时定量PCR技术拥有许多的优点，但是也存在了诸如易受样本中干扰剂的影响、RNA提取过程中会有一定量的人为损失、检测时间长等缺点。

因此，开发一种体液原位检测的技术，达到快速、高效、准确的检测目的尤为重要。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种硅基探针材料的制备方法，该硅基探针材料的制备方法简单、重现性好、得到的材料稳定均一。

本发明的第二目的在于提供一种硅基探针材料，提供一种体液原位检测技术用新材料，该材料用于制备硅基探针，可以实现快速、高效、准确检测体液中目标物质量。

本发明的第三目的在于提供一种硅基探针，以缓解现有技术中体液原位检测技术费时费力，成本高，提供一种新的材料和新的技术。

本发明的第四目的在于提供硅基探针的制备方法，该方法简单易操作，硅基探针检测特异性好。

本发明的第五目的在于提供硅基探针在制备诊断和/或预后评估心脏疾病的产品中的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种硅基探针材料的制备方法，包括以下步骤：

a)十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵进行羟基化处理得到羟基化硅球；

b)羟基化硅球进行氨基化处理得到氨基化硅球；

c)氨基化硅球进行羰基化处理得到羰基化硅球；

d)羰基化硅球引入PEG得到硅基探针材料。

进一步地，所述1)中的羟基化包括：十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵，与正硅酸乙酯在75-85℃温度下反应，得到羟基化硅球；

优选地，十六烷基三甲基溴化铵或十六烷基氯化铵，与正硅酸乙酯的反应摩尔比为1：(7-9)；

优选地，所述反应时间为1.5-2.5小时；

优选地，所述反应后还依次包括固液分离、洗涤和冻干的步骤；

优选地，所述洗涤依次包括纯水洗涤和无水乙醇洗涤。