[发明专利]一种植物非固体组培培养基及植物非固体组培方法

权利要求书

1.一种非固体植物组培培养基，其特征在于，所述培养基为液体培养基中加入限定量的凝固剂的非固体培养基，凝固剂的浓度为0.25～6g/L。

2.根据权利要求1所述一种非固体植物组培培养基，其特征在于，所述凝固剂为琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为1～5.5g/L，琼脂糖的浓度为0.25～4.5g/L，卡拉胶浓度为1.5～6g/L。

3.根据权利要求1或2所述一种非固体植物组培培养基，其特征在于，将高温高压灭菌过的滤纸或无纺布或海绵支撑物平铺在培养基液面上。

4.根据权利要求2所述一种非固体植物组培培养基，其特征在于，其用于茎段育苗期，具体配方组成为：MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0。

5.根据权利要求2所述一种非固体植物组培培养基，其特征在于，其用于丛生苗育苗时，具体配方组成为：丛生苗继代增殖期，培养基配方为：MS+TDZ 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0；壮苗生根期，培养基配方为：MS+NAA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0。

6.一种植物非固体培养基的组培方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)外植体的选择和获取：以带芽茎段或丛生苗为外植体，选择外植体获取材料，进行预处理得到外植体；

(2)配制非固体培养基，所述非固定培养基为向液体培养基中加入限定量的凝固剂，凝固剂的浓度为0.25～6g/L，将非固体培养基倒入组培容器中，高温高压灭菌，冷却后为液态，打开组织容器瓶盖，再将高温高压灭菌过的滤纸或无纺布或海绵支撑物平铺在液面上；

(3)培养：将处理好的带芽茎段或1～2cm丛生苗均匀平放在支撑物上，将接种好茎段或丛生苗的组培容器放置于培养架上进行培养，并按照各阶段培养的营养需求调整培养基配方，直至成苗。

7.根据权利要求6所述一种植物非固体组培方法，其特征在于，所述凝固剂为琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为1～5.5g/L，琼脂糖的浓度为0.25～4.5g/L，卡拉胶浓度为1.5～6g/L。

8.用权利要求6～7任意一种所述植物非固体组培方法应用在金线莲和霍山石斛组培快繁上。

9.根据权利要求8所述植物非固体组培方法在金线莲液体组培快繁上的应用，其特征在于，选用金线莲茎段为外植体，采用非固体培养基进行一步成苗培养，所述非固体培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，培养基pH为：5.4～6.0；培养的具体条件为：25～28℃，光照强度50～60μmol·m^-2·s^-1，光周期10h/d。

10.根据权利要求9所述植物非固体组培方法在金线莲组培快繁上的应用，其特征在于，外植体获取材料的预处理方法为：在超净工作台上取出金线莲植株，去掉金线莲叶片和茎基部，将茎段切成1～2cm带芽茎段。