[发明专利]一种植物非固体组培培养基及植物非固体组培方法

说明书

本发明公开了一种植物非固体组培培养基及植物非固体组培方法，其中，所述非固体培养基中加入琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为1～5.5g/L，琼脂糖的浓度为1～5g/L，卡拉胶浓度为1.5～6g/L；所述植物非固体组培方法包括如下步骤：(1)外植体的选择和获取；(2)配制非固体培养基，将培养基分装到组培容器中，高温高压灭菌,冷却后，打开组织容器瓶盖，再将高温高压灭菌过的滤纸、无纺布、海绵等支撑物平铺在液面上；(3)培养。本发明在现在的液体培养基配方基础上，加入琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为1～5.5g/L，琼脂糖的浓度为1～5g/L，卡拉胶浓度为1.5～6g/L，使得培养基具备了一定的支撑能力，在植物非固体组培过程中对支撑物具有一定支撑能力，进一步提高了支撑物对外植体支撑能力，避免外植体被泡死，便于产业化推广。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，涉及一种植物非固体组培培养基及植物非固体组培方法。

背景技术

目前，大多数的组培工厂采用的是植物固体组培方法，培养成本高，瓶苗生长速度慢，瓶苗根系难清洗且容易受损。而现有的非固体组培方法，根据相关文献和专利报道主要采用浅层液体培养，需要进行震荡培养，另外，也有专利报道将海绵放入营养液中浸泡，再将沾有营养液的海绵放入瓶中进行外植体的培养，该方法植物容易缺乏营养，需要中途开瓶补液，操作较复杂且污染风险大，不便于产业化推广。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明要解决的技术问题是提供一种植物非固体组培方法，其通过向现有液体组培配方中加入凝固剂，并将凝固剂的浓度调至合适区间，使海绵、无纺布、滤纸等支撑物具有支撑能力的同时且能保证较好吸收营养的效果，外植体不易泡死，瓶苗生长速度快。另外，以滤纸作为支撑物还能更好解决瓶苗种植前根系难清洗且易伤根的难题，节约劳动力，提高效率，降低成本。

本发明采取的技术方案是：

一种非固体植物组培培养基，其特征在于，所述培养基为液体培养基中加入限定量的凝固剂的非固体培养基，凝固剂的浓度为0.25～6g/L。

为了更好的实现本发明，所述凝固剂为琼脂或琼脂糖或卡拉胶，琼脂的浓度为1～5.5g/L，琼脂糖的浓度为0.25～4.5g/L，卡拉胶浓度为1.5～6g/L。

为了更好的实现本发明，将高温高压灭菌过的滤纸或无纺布或海绵支撑物平铺在培养基液面上。

为了更好的实现本发明，其用于茎段育苗期，具体配方组成为：MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0。

为了更好的实现本发明，其用于丛生苗育苗时，具体配方组成为：丛生苗继代增殖期，培养基配方为：MS+TDZ 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0；壮苗生根期，培养基配方为：MS+NAA 0.3mg/L+琼脂1～5.5g/L或琼脂糖0.25～4.5g/L或卡拉胶1.5～6g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.1％，pH为：5.4～6.0。

相应地，本发明还提供了一种植物非固体培养基的组培方法，包括如下步骤：

(1)外植体的选择和获取：以带芽茎段或丛生苗为外植体，选择外植体获取材料，进行预处理得到外植体；

(2)配制非固体培养基，所述非固定培养基为向液体培养基中加入限定量的凝固剂，凝固剂的浓度为0.25～6g/L，将非固体培养基倒入组培容器中，高温高压灭菌,冷却后，打开组织容器瓶盖，再将高温高压灭菌过的滤纸或无纺布或海绵等支撑物平铺在液面上；