[发明专利]重组恶臭假单胞菌株的构建及其在转化苏氨酸合成丙酸中的应用有效

专利信息
申请号: 201910572968.4 申请日: 2019-06-28
公开(公告)号: CN112143689B 公开(公告)日: 2023-01-03
发明(设计)人: 马超;于波;马延和;陶勇 申请(专利权)人: 中国科学院微生物研究所
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/78;C12P7/52;C12R1/40
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 白艳
地址: 100101 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 重组 恶臭 假单胞 菌株 构建 及其 转化 苏氨酸 合成 丙酸 中的 应用
【权利要求书】:

1.重组菌,为如下任一种:

制备方式为将恶臭假单胞菌KT2440基因组上的prpC基因替换为tdcBC基因和驱动其基因表达的lac启动子,且敲除基因组上的ltaE基因,且将基因组中的bkd基因簇启动子及bkdR基因替换为J23119启动子,其他序列不变,得到的重组菌;

或,制备方式为将恶臭假单胞菌KT2440基因组上的prpC基因替换为tdcBC基因和驱动其基因表达的lac启动子,将ltaE基因替换为ilvA基因和驱动其基因表达的lac启动子,且将基因组中的bkd基因簇启动子及bkdR基因替换为J23119启动子,其他序列不变,得到的重组菌;

或,制备方式为将恶臭假单胞菌KT2440基因组上的prpC基因替换为tdcBC基因和驱动其基因表达的lac启动子,将ltaE基因替换为ilvA基因和驱动其基因表达的lac启动子,将基因组中的将bkd基因簇启动子及bkdR基因替换为J23119启动子,且将lacI基因替换为HiYciA基因和驱动其基因表达的lac启动子,其他序列不变,得到的重组菌;

或,制备方式为将恶臭假单胞菌KT2440基因组上的prpC基因替换为tdcBC基因和驱动其基因表达的lac启动子,将ltaE基因替换为ilvA基因和驱动其基因表达的lac启动子,将基因组中的将bkd基因簇启动子及bkdR基因替换为J23119启动子,将lacI基因替换为HiYciA基因和驱动其基因表达的lac启动子,且将prpE基因敲除,其他序列不变,得到的重组菌;

或,制备方式为将恶臭假单胞菌KT2440基因组上的prpC基因替换为tdcBC基因和驱动其基因表达的lac启动子,将ltaE基因替换为ilvA基因和驱动其基因表达的lac启动子,将基因组中的将bkd基因簇启动子及bkdR基因替换为J23119启动子,将lacI基因替换为HiYciA基因和驱动其基因表达的lac启动子,将prpE基因敲除,且将rhtA基因敲除,其他序列不变,得到的重组菌。

2.根据权利要求1所述的重组菌,其特征在于:

所述敲除或所述替换采用同源重组的方式进行。

3.根据权利要求2所述的重组菌,其特征在于:

所述敲除或所述替换采用λ-red同源重组系统或sacB基因介导筛选的同源重组。

4.一种制备权利要求1所述重组菌的方法,其特征在于:将恶臭假单胞菌按照权利要求1中的制备方式进行改造,得到重组菌。

5.权利要求1所述重组菌在利用苏氨酸生产或制备丙酸中的应用。

6.一种制备丙酸的方法,包括如下步骤:权利要求1所述重组菌催化苏氨酸,得到丙酸。

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