[发明专利]环肽emericellamide G及其制备方法和在制备酶抑制剂中的应用

说明书

本发明公开了环肽emericellamide G及其制备方法和在制备蛋白酪氨酸磷酸酶TCPTP抑制剂和SHP1抑制剂中的应用。所述的环肽emericellamide G的结构式如式(Ⅰ)所示。环肽emericellamide G是从Asprergillus puniceus SCSIO z021的发酵液中分离得到的，经试验证明，本发明的环肽emericellamide G具有抑制蛋白酪氨酸磷酸酶TCPTP和SHP1活性，它可用于TCPTP抑制剂和SHP1抑制剂先导化合物的研究。

技术领域

本发明属于海洋生物领域，具体涉及环肽emericellamide G及其制备方法和在制备蛋白酪氨酸磷酸酶TCPTP抑制剂和SHP1抑制剂中的应用。

背景技术

目前，恶性肿瘤的诊疗仍是医学界最大的挑战之一，而传统的恶性肿瘤治疗手段如化疗和放疗等，虽经不断发展，却仍存在一定的局限和弊端，如不良反应大及易诱导耐药等。蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphataese，PTPs)在生物体中广泛存在，与蛋白磷酸酶相关的疾病有糖尿病、癌症、肥胖症和老年痴呆症等，近年来引起科学家们的极大关注。一些PTPs，比如SHP1，SHP2，PTP1B，TCPTP等已成为抗肿瘤药物等新药开发的新靶标。找到有效且选择性高的PTPs抑制剂是未来临床治疗的重要方向。

发明内容

本发明的第一个目的是提供对蛋白酪氨酸磷酸酶TCPTP和SHP1有抑制作用的新环肽emericellamide G。

本发明的新环肽emericellamide G，其结构式如式(Ⅰ)所示，

本发明的第二个目的是提供化合物emericellamide G的制备方法，它是从真菌Asprergillus puniceus SCSIO z021的发酵液和/或菌丝体中分离得到的。

优选，具体步骤如下：

(a)制备真菌Asprergillus puniceus SCSIO z021的发酵液和菌丝体；

(b)将步骤(a)得到的发酵液用大孔树脂吸附，接着用水冲洗大孔树脂去掉培养基成分，再用甲醇或乙醇冲洗大孔树脂，冲洗液浓缩后分别得到甲醇或乙醇提取物；或将步骤(a)得到的发酵液用乙酸乙酯、二氯甲烷或氯仿溶剂萃取，萃取液浓缩得到乙酸乙酯提取物、二氯甲烷提取物或氯仿提取物；菌丝体破碎后用丙酮或甲醇浸泡，浸泡液减压浓缩除去丙酮或甲醇，剩余水相用乙酸乙酯萃取，浓缩得菌体的乙酸乙酯提取物；

(c)将步骤(b)所述甲醇提取物、乙醇提取物、发酵液的乙酸乙酯提取物、菌体的乙酸乙酯提取物、二氯甲烷提取物或氯仿提取物经过正相硅胶柱层析，依次用二氯甲烷:甲醇体积比为100:0,98:2,95:5,92:8,90:10,80:20,70:30的溶剂系统梯度洗脱，收集二氯甲烷:甲醇体积比90:10冲洗下来的样品得到组分Fr.6；Fr.6再次经过正相硅胶柱层析，依次用二氯甲烷:丙酮体积比为100:0,95:5,90:10,80:20,70:30,50:50的溶剂系统梯度洗脱，收集二氯甲烷:丙酮体积比50:50冲洗下来的样品，经过重结晶得到化合物emericellamideG。

进一步优选，步骤(a)中所述的发酵液是通过以下方法制备：将真菌Asprergilluspuniceus SCSIO z021在真菌适用的平板培养基中生长，待真菌长出孢子后，将真菌接种到发酵培养基中，于室温静置培养25天，得到发酵液和菌丝体，所述的发酵培养基每升是通过以下方法配制的：用500mL的纯水煮200g的马铃薯，煮沸20min，过滤得马铃薯汁，再加入葡萄糖20g、海盐30g，用水补足至1000mL。

进一步优选，步骤(b)所述的浓缩是采用减压浓缩。