[发明专利]一种提取分离植物色素组分的高效液相方法

权利要求书

1.一种提取分离植物叶绿体色素的高效液相方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)标准品溶液的配制：取标准品，溶解，制得标准品溶液；

(2)供试品溶液的配制：取新鲜叶片，研磨提取色素，制得供试品溶液；

(3)分别吸取标准品溶液、供试品溶液注入高效液相色谱仪，其色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：440-450nm；流动相：以甲醇-乙腈-四氢呋喃混合溶液为流动相A，以甲醇-乙酸乙酯混合溶液为流动相B；

其流动相所采用的线性梯度洗脱程序如下：

0～9min，流动相A相所占的体积比为100％，流动相B相所占的体积比为0％；

9～12min，流动相A相所占的体积比为100％→0％，流动相B相所占的体积比为0％→100％；

12～30min流动相A相所占的体积比为0％，流动相B相所占的体积比为100％；

30～40min流动相A相所占的体积比为100％，流动相B相所占的体积比为0％；

其中，所述植物为双子叶植物豌豆或莱茵衣藻中的一种；

步骤(1)中溶解采用的溶剂为乙醇；所述标准品包括：新黄质、紫黄质、叶黄素、玉米黄质、叶绿素a、叶绿素b；

步骤(2)中提取色素的方法如下：取新鲜叶片置于4℃预冷的80％丙酮中，快速充分研磨，离心，离心条件为4℃、18000g×10min，取上清，即得供试品溶液；

步骤(3)中所述色谱条件中流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量为10μL；所述流动相A中甲醇-乙腈-四氢呋喃的比例为81：14：5；流动相B中甲醇-乙酸乙酯的比例为70：30。

2.根据权利要求1所述的提取分离植物叶绿体色素的高效液相方法，其特征在于，步骤(2)中提取色素是加入丙酮研磨提取。

3.根据权利要求1所述的提取分离植物叶绿体色素的高效液相方法，其特征在于，步骤(3)中所用色谱柱为GRACE-C₁₈色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm。

4.根据权利要求1所述的提取分离植物叶绿体色素的高效液相方法，其特征在于，步骤(3)中所述检测波长为445nm。