[发明专利]一种提取分离植物色素组分的高效液相方法

说明书

本发明属于化学成分分离提纯技术领域，具体涉及一种提取分离植物色素组分的高效液相方法。本发明所述促进植物色素的分离提取，能够直观地定性定量分析植物叶绿体内色素组成与含量，准确观测植物生理生化方面的一系列生命指数。色素的动态变化从一定程度上可以反应植物的光合能力及植物所处环境的顺逆境，从而解决植物工厂人工环境条件下植物的生长发育调控难题。

技术领域

本发明属于化学成分分离提纯技术领域，具体涉及一种提取分离植物色素组分的高效液相方法。

背景技术

光合作用，即光能合成作用，是植物、藻类和某些细菌，在可见光的照射下，利用光合色素，将二氧化碳(或硫化氢)和水转化为有机物，并释放出氧气(或氢气)的生化过程.光合作用是一系列复杂的代谢反应的总和，是生物界赖以生存的基础，也是地球碳氧循环的重要媒介。

在光合作用过程中，植物的光合色素对光能进行吸收、运输、及转换为体内的有机物。光合色素存在于叶绿体类囊体膜，包含叶绿素、反应中心色素和辅助色素。几类色素的吸收光谱不同，叶绿素a、b吸收红，橙，蓝，紫光，类胡萝卜素吸收蓝紫光，吸收率最低的为绿光。叶绿体的不同色素在光合作用中的分工不同，所以不同色素的比例关系也会影响光合作用，光合效率及叶片的颜色。对于浮游植物来说，浮游植物色素具有重要的指标作用，例如浮游植物色素中的类胡萝卜素可以作为生物标志物，可以较好的指示浮游生物群落结构。对色素深入研究，可以更好的阐述浮游生物群落变化，深入了解海洋生态环境变化，对于研究整体地球生态圈化学反应循环具有非常重要的意义。

光合色素在生长过程中是处于不断合成和破坏的，每个色素组分的含量是两者动态平衡的表现。所以色素含量在一定程度上能反映植株的的生理生化指标例如：光合强度、营养水平及健康状况等。监测植株叶绿体色素组分的含量，对于研究植株的色素变化规律是十分有必要的，进一步解决人工环境中调控植物生长发育的难题。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效快速分离分析绿色植物色素的液相方法。

为解决上述问题，本发明采用的技术方案为：

一种提取分离植物叶绿体色素的高效液相方法，包括以下步骤：

(1)标准品溶液的配制：取标准品，溶解，制得标准品溶液；

(2)供试品溶液的配制：取新鲜叶片，研磨提取色素，制得供试品溶液；

(3)分别吸取标准品溶液、供试品溶液注入高效液相色谱仪，其色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：300～600nm；流动相：以甲醇-乙腈-四氢呋喃混合溶液为流动相A，以甲醇-乙酸乙酯混合溶液为流动相B；

其流动相所采用的线性梯度洗脱程序如下：

0～9min，流动相A相所占的体积比为100％，流动相B相所占的体积比为0％；

9～12min，流动相A相所占的体积比为100％→0％，流动相B相所占的体积比为0％→100％；

12～30min流动相A相所占的体积比为0％，流动相B相所占的体积比为100％；

30～40min流动相A相所占的体积比为100％，流动相B相所占的体积比为0％；

优选的，步骤(1)中所述标准品包括：新黄质、紫黄质、叶黄素、玉米黄质、叶绿素a、叶绿素b。

优选的，步骤(1)中溶解采用的溶剂为乙醇。

优选的，步骤(2)中提取色素是加入丙酮研磨提取。

优选的，步骤(2)中所述提取方法如下：取新鲜叶片置于4℃预冷的80％丙酮中，快速充分研磨，离心(4℃，18000_×g×10min)，取上清，即得供试品溶液。