[发明专利]一种抗CD4和TGFβ的双特异性抗体、其药物组合及其用途

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种双特异性抗体，至少包括：第一蛋白功能区，所述第一蛋白功能区靶向CD4，所述第一蛋白功能区为抗CD4的抗体或其抗原结合片段；第二蛋白功能区，所述第二蛋白功能区靶向TGFβ1，所述第二蛋白功能区为抗TGFβ1的抗体或其抗原结合片段。本发明的双特异性抗体CT101能够很好地特异性与CD4结合，特异性地结合到辅助性T细胞上；与此同时，CT101也能与TGFβ1结合，并且能够十分有效地阻断TGFβ1与TGFβRII的结合，从而特异地解除TGFβ对辅助性T细胞的免疫抑制。具有用于制备防治肝癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、宫颈癌、卵巢癌、淋巴瘤、结肠癌、直肠癌等恶性肿瘤的药物的作用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗CD4和TGFβ的双特异性抗体、其药物组合及其用途。

背景技术

肿瘤尤其是恶性肿瘤是当今世界严重危害人类健康的疾病，在各种疾病所导致的死亡中高居第二位。随着近年来环境污染，人们生活压力增大，恶性肿瘤发病率呈逐年上升趋势。而且，恶性肿瘤治疗效果差，尤其是晚期转移率高，预后多不佳。目前临床上采用的常规疗法如放疗、化疗、靶向治疗或手术治疗虽一定程度上缓解了病情，延长了生存时间，但这些方法仍然存在很大的局限性，不仅仅是体现在治疗效果上，而且很多恶性肿瘤病人仍然没有有效的治疗方案，例如胰腺癌等。

TGFβ于1981年首次被鉴别(Robert等人，PNAS，78：5339-5343.(1981))。转化生长因子β，因最初其将正常成纤维细胞转化为不依赖锚定生长的细胞的能力，而命名的多功能细胞因子。

TGFβ家族成员一般有TGFβ1、TGFβ2和TGFβ3。其中，人TGFβ与小鼠TGFβ保守性非常高：人TGFβ1与小鼠TGFβ1只有一个氨基酸的差异，人TGFβ2与小鼠TGFβ2只有三个氨基酸的差异，人TGFβ3与小鼠TGFβ3相同。

具有生物学活性的TGFβ一般以二聚体的形式错在，当其与细胞表面的TGFβTypeII受体(TGFβRII)结合后，就会与临近的TGFβtype I受体(TGFβRI)结合，共同形成六聚体。随后，由于TGFβ的结合，TGFβRII丝氨酸/苏氨酸激酶的活性被激活。此时，TGFβRII使TGFβRI上一些关键的丝氨酸被磷酸化，激活了其丝氨酸/苏氨酸激酶的活性。这个磷酸化过程会持续向下游进行，使临近的regulatory SMAD(R-SMAD)被磷酸化，主要包括SMAD2，3，9等等(通常R-SMAD会被SARA蛋白固定在细胞膜内部)。被磷酸化的R-SMAD对于细胞质游离的Co-SMAD(如SMAD4)有着极高的亲和力，于是形成了R-SAMD-Co-SMAD聚合物。它将进入细胞核，与转录因子共同结合到DNA上，启动下游基因的表达(Sporn等，Science，233：532(1986))。

然而，TGFβ并不能直接作用于细胞表面的受体。在正常情况下，只有少量的游离态TGFβ可以与受体结合，而大多数TGFβ都是与latency-associated peptide(LAP)结合，不具有活性。TGFβ共有四种形态，只有当TGFβ-LAP聚体被肿瘤微环境中的蛋白酶(由肿瘤细胞分泌)剪切，形成游离态，才能激活TGFβ。关于TGFβ及其作用的一般性综述可参见相应的文献(Joan Massague，TGFβin Cancer.Cell，134(2):215-230(2008))。

TGFβ是一类重要的细胞因子。TGFβ信号通路能够调控细胞的生长，分化以及细胞凋亡，是细胞维持正常功能不可或缺的重要部分。然而，TGFβ却能操控肿瘤微环境，具有致癌作用。恶性肿瘤细胞会大量分泌TGFβ蛋白，一方面让癌细胞加速成长和扩散，另一方面令癌细胞绕过免疫系统的攻击。