[发明专利]一种高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉及其分离培养方法和应用

权利要求书

1.一种高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉，其特征在于，所述高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉命名为红曲霉(Monascus anka)T4菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2019年2月25日，保藏编号为CGMCC No.17074，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括如下步骤：

(1)将酒曲与无菌水混合后得到菌悬液；

(2)将步骤(1)得到的菌悬液稀释后于无菌麸皮汁培养基上进行培养，获得菌落；

(3)挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌麸皮汁固体培养基上进行分离纯化，获得单个纯种菌落并筛选出所述高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉。

3.如权利要求2所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉的分离培养方法，其特征在于，步骤(2)所述无菌麸皮汁培养基的成分包括麸皮汁、葡萄糖、乳酸、酵母膏和琼脂粉；

优选地，所述麸皮汁的制备方法为：将麸皮与水混合后加热，过滤，即得麸皮汁；

优选地，所述麸皮与水的质量比为1:(7-10)；

优选地，所述加热是指加热煮沸后保持20-30min。

4.如权利要求3所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉的分离培养方法，其特征在于，所述葡萄糖、乳酸、酵母膏和琼脂粉在麸皮汁中的质量体积分数分别为0.5-2％、0.01-0.3％、0.2-2％和1-2.5％；

优选地，所述葡萄糖、乳酸、酵母膏和琼脂粉在麸皮汁中的质量体积分数分别为1％、0.15％、0.5％和1.8％。

5.如权利要求2-4中任一项所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉的分离培养方法，其特征在于，步骤(2)中是将步骤(1)得到的菌悬液稀释后用滚珠法涂布于无菌麸皮汁固体培养基上进行培养；

优选地，所述培养的温度为20-45℃；

优选地，所述培养的时间为5-10天；

优选地，步骤(3)所述分离纯化的方法为：挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌麸皮汁固体培养基上划线培养，进行2-3次重复的操作达到分离纯化的目的；

优选地，所述形态规则的菌落是指培养前期呈白色、后期呈红色、粉色或紫红色且形态规则的菌落；

优选地，步骤(3)所述筛选得到的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉保藏于无菌麸皮汁固体培养基中备用。

6.如权利要求2-5中任一项所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括如下步骤：

(1)将酒曲与无菌水混合后得到菌悬液；

(2)将步骤(1)得到的菌悬液稀释后用滚珠法涂布于无菌麸皮汁固体培养基上在20-45℃下进行培养5-10天，获得菌落；

(3)挑取步骤(2)中形态规则的菌落在无菌麸皮汁固体培养基上划线培养，进行2-3次重复的操作分离纯化，获得单个纯种菌落并筛选出所述高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉。

7.一种高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲，其特征在于，所述红曲是由如权利要求1所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉经过发酵制备得到的。

8.如权利要求7所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：将红曲霉接种于麸皮培养基，进行恒温培养，得到所述高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲。

9.如权利要求8所述的高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲的制备方法，其特征在于，所述麸皮培养基由麸皮与质量浓度为0.1-3％的乳酸水溶液混合得到；

优选地，所述麸皮培养基的含水率为60-65％；

优选地，所述培养的温度为25-38℃；

优选地，所述培养的时间为5-10天。

10.如权利要求1所述的红曲霉或权利要求7所述的红曲在酿酒中的应用。