[发明专利]一种用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子在审
申请号: | 201910592642.8 | 申请日: | 2019-07-03 |
公开(公告)号: | CN110308123A | 公开(公告)日: | 2019-10-08 |
发明(设计)人: | 张连文;李玲;谢飞;汤宁宁 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 陈炳萍 |
地址: | 300353 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 荧光报告 高通量筛选 抑制剂 分子生物学领域 报告基因 方案解决 内参基因 转录因子 构建 | ||
1.一种用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于,包括:荧光报告系统,所述荧光报告系统用于生成荧光报告分子,所述荧光报告分子包括转录因子、报告基因和内参基因,所述报告基因为第一报告基因或第二报告基因IG。
2.根据权利要求1所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述转录因子为功能受O-GlcNAc修饰影响的转录因子TF。
3.根据权利要求2所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述第一报告基因包括1条活性受转录调控的转录启动子和所述转录启动子驱动表达的增强型绿色荧光蛋白eGFP。
4.根据权利要求2所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述内参基因包括CMV启动子和所述CMV启动子驱动表达的红色荧光蛋白。
5.根据权利要求1所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述报告基因和所述内参基因之间间隔有转录终止序列和翻译终止序列。
6.根据权利要求1所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述转录因子为功能上受O-GlcNAc修饰影响的转录因子NeuroD1。
7.根据权利要求6所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述第二报告基因IG为胰岛素启动子IP驱动表达的增强型绿色荧光蛋白eGFP,其中所述第二报告基因IG受所述转录因子NeuroD1的调控。
8.根据权利要求6所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述内参基因CR是CMV启动子驱动表达的红色荧光蛋白RFP。
9.根据权利要求1所述的用于OGT抑制剂高通量筛选的荧光报告分子,其特征在于:所述报告基因和内参基因之间间隔有转录终止信号和翻译终止密码子,将所述转录因子NeuroD1通过P2A连在红色荧光蛋白RFP下游,使转录因子NeuroD1和红色荧光蛋白RFP共用一个CMV启动子。
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