[发明专利]欧乌碱和12-表-欧乌碱的分离方法

说明书

本发明提供了一种欧乌碱和12‑表‑欧乌碱的分离方法，属于医药领域。其包括：将含有欧乌碱和12‑表‑欧乌碱的混合物C上样至氨基色谱柱，以正己烷－二氯甲烷－甲醇三元混合溶剂为洗脱剂，氨基色谱填料与混合物C的质量比为16‑24：1，分离得到欧乌碱和12‑表‑欧乌碱。该方法无需使用高精度的分离设备(例如HPLC)，仅通过柱分离就能够实现欧乌碱与12‑表‑欧乌碱这两个性质极为相似的同分异构体的有效分离，方法简单有效，可重现性强。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体而言，涉及一种欧乌碱和12-表-欧 乌碱的分离方法。

背景技术

目前，对于植物药的开发利用首先是对其中的具有相关疗效的有 效化学成分进行提取和分离，并纯化得到有一定治疗效果的单一成 分。其中，生物碱是一类具有显著生理活性的含氮有机化合物，许多 药用植物中均富含生物碱，是中药的重要组部分。生物碱有效成分的 分离与纯化是中药开发的难点与关键。

多根乌头(Aconitum karakolicum Rap.)为毛茛科乌头属 (Aconitum L.)植物，分布于我国新疆伊犁地区海拔2000～3000m 的山坡草地，分布集中，主要用于治疗神经痛、心绞痛、肾炎等疾病。 其中，多根乌头中含有丰富的生物碱，且欧乌碱(napelline)和12-表-欧乌碱(12-epi-napelline)含量较高。

然而，欧乌碱和12-表-欧乌碱互为同分异构体，分子式均为 C₂₂H₃₃NO₃，均属于C-20型二萜生物碱。两者的不同之处仅在于欧乌 碱12位羟基的构型为α-型，而12-表-欧乌碱12位羟基的构型为β -型，两者的化学结构如下式所示。

由于欧乌碱和12-表-欧乌碱之间的结构差异非常小，使得这两 者的化学性质极为相似，难以采用常规的柱分离和纯化方法将其二者 分离。鉴于此，特提出本申请。

发明内容

本发明的目的在于提供一种欧乌碱和12-表-欧乌碱的分离方 法，该方法无需使用高精度的分离设备(例如HPLC)，仅通过柱分离 就能够实现欧乌碱与12-表-欧乌碱这两个性质极为相似的同分异构 体的有效分离，方法简单有效，可重现性强。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种欧乌碱和12-表-欧乌碱的分离方法，其包括：

将含有欧乌碱和12-表-欧乌碱的混合物C上样至氨基色谱柱， 以正己烷－二氯甲烷－甲醇三元混合溶剂为洗脱剂，氨基色谱填料与 混合物C的质量比为16-24：1，分离得到欧乌碱和12-表-欧乌碱。

进一步地，在本发明较佳的实施方式中，上述在采用氨基色谱柱 分离混合物C的过程中，正己烷、二氯甲烷和甲醇三者的体积比依次 为：90:5:5、80:10:10、70:15:15、60:25:15、50:25:25、40:30:30， 每个体积比的正己烷－二氯甲烷－甲醇三元混合溶剂分别洗脱 1.5-2.5个柱体积。

进一步地，在本发明较佳的实施方式中，收集体积比为80:10:10 的正己烷－二氯甲烷－甲醇三元混合溶剂洗脱的组分，得到欧乌碱； 收集体积比为50:25:25的正己烷－二氯甲烷－甲醇三元混合溶剂洗 脱的组分，得到12-表-欧乌碱。

进一步地，在本发明较佳的实施方式中，上述混合物C的分离方 法包括：

采用酸提碱沉法提取乌头粉末，得到乌头总碱A；

将乌头总碱A溶于pH值为3-5的醇溶液中，将所得溶液通过阳 离子交换树脂色谱柱，依次用水和氨水溶液进行洗脱后，将阳离子交 换树脂色谱柱中的树脂取出，并采用加热回流提取法进行提取，得到 乌头总生物碱B；

采用反相色谱C18柱分离乌头总生物碱B，得到混合物C。