[发明专利]一种细胞制备培养系统及方法

权利要求书

1.一种细胞制备培养系统，其特征在于：包括分离培养罐、动力系统和控制器，所述分离培养罐通过管道网连接所述动力系统；

所述管道网包括主管路和第一分管、第二分管；所述主管路一端连接所述分离培养罐，另一端分别连接第一分管和第二分管；所述第一分管分别通过多条前端支管分别连接细胞样品供应部、生理盐水供应部、分离液供应部、细胞培养液供应部和微载体供应部；

所述第二分管分别通过多条后端支管分别连接终产品存储部、中转袋和废液存储部；

所述第一分管、第二分管、前端支管及后端支管上均连接有控制阀，所述动力系统、分离培养罐及控制阀的控制端均电连接到所述控制器；

所述动力系统在所述控制器作用下动作为所述管道网内部介质提供驱动力。

2.根据权利要求1所述的一种细胞制备培养系统，其特征在于：所述培养系统还包括通过管道网分别与分离培养罐连通的消化酶供应部、磁珠供应部和非目标细胞存储部，在所述分离培养罐与所述消化酶供应部、与磁珠供应部、与非目标细胞存储部之间的局部管道网上分别连接有控制阀；所述控制阀的控制端均连接所述控制器；

所述分离培养罐与磁珠供应部连接的局部管道网上连接有用于对目标细胞进行分选的磁分选装置。

3.根据权利要求2所述的一种细胞制备培养系统，其特征在于：所述培养系统还包括与分离培养罐连通形成独立流路的计数池，用以对细胞计数以及形态观测。

4.根据权利要求3所述的一种细胞制备培养系统，其特征在于：所述动力系统为蠕动泵，所述控制阀为电磁阀，每个所述电磁阀自动控制一个管路的通断。

5.根据权利要求4所述的一种细胞制备培养系统，其特征在于：所述培养系统还包括设置在管道网各个管路中的流量传感器，用以监测各个管路的流量并将信号传输至控制器。

6.根据权利要求5所述的一种细胞制备培养系统，其特征在于：所述培养系统还包括与分离培养罐连通的混合气体供应罐，用以适时提供氧气、二氧化碳、氮气或压缩空气，供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需的各种成分。

7.一种细胞制备培养方法，其特征在于：采用上述细胞制备培养系统执行以下步骤，

S1：从生理盐水供应部将生理盐水引入到管道网，将管道网各个管路中的空气排出至废液存储部；

S2：分别从细胞样品供应部和分离液供应部将细胞样品和分离液分别输送至分离培养罐；

S3：转动分离培养罐，对分离培养罐内的细胞样品和分离液进行物理学密度梯度离心分离，得到分层的PBMC与废弃液；

S4：将分离培养罐内废弃液转移至废液存储部，向分离培养罐中引入生理盐水对PBMC进行洗涤；

S5：洗涤结束后再分别从细胞培养液供应部和微载体供应部向分离培养罐引入细胞培养液和微载体，分离培养罐持续转动完成PBMC在微载体上的贴附和扩增；

S6：重复步骤S4后，通过分离培养罐中的搅拌装置搅拌使得PBMC脱落，再降低分离培养罐转速使微载体沉淀；

S8：收集S6中所述的PBMC输入中转袋，排出分离培养罐中的微载体至废液存储部；

S9：将中转袋中的PBMC再回转至分离培养罐并引入生理盐水进行洗涤，而后获得PBMC终产品并转移至终产品存储部。

8.根据权利要求7所述的一种细胞制备培养方法，其特征在于：所述步骤S5中，扩增的步骤包括：

从分离培养罐内采集部分样品进入计数池；

对计数池内的细胞进行计数和形态观察，在细胞数量和形态均达到阈值时输出信号。

9.根据权利要求8所述的一种细胞制备培养方法，其特征在于：所述细胞数量阈值设定的步骤包括：

在进行计数和形态观察时，根据单次导入到计数池内的细胞数量绘制生长曲线；

将生长曲线的峰值设定为阈值。

10.根据权利要求7-9任一项所述的一种细胞制备培养方法，其特征在于：所述形态阈值设定的步骤包括：

在计数池中只有细胞而无其他异物时通过显微镜采集成像图片；

提取图片中除细胞之外的异物成像信息；

将异物成像信息转换为数值；

将所述数值设定为所述形态阈值。