[发明专利]一种两地汤的HPLC特征图谱的检测方法

权利要求书

1.一种两地汤的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：取待测两地汤制剂，制备供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：取芍药苷和哈巴俄苷，配置对照品溶液；

（3）对照特征图谱的制定：分别吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，依据N批以上供试品所测得的图谱，生成对照特征图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其他共有峰的相对保留时间；

所述的步骤（3）中，色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶填充剂色谱柱；流动相A为甲醇；B为0.02%~0.5%的磷酸溶液；梯度洗脱；流速为0.6～1.4ml/min；检测波长为200～300nm；柱温20～50℃；理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

所述的步骤（3）中，采用梯度洗脱方法，为：0→10min：5→23.5%A；10→20min：23.5%A；20→58min：23.5→63%A；58→60min：63→90%A；

所述的步骤（1）中，供试品溶液的制备方法为：精密称取待测两地汤制剂，加水溶解，加入4倍体积量乙腈，超声提取，过滤，滤液蒸干，残渣加低浓度甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的步骤（2）中，对照品溶液的制备方法为：取对照品加甲醇制成每1ml含芍药苷180μg、哈巴俄苷20μg的混合溶液，即得。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的步骤（3）中，高效液相色谱法的进样量为5-20μl；所述N为10-20；以参照物色谱峰保留时间为基准，计算其他共有色谱峰的相对保留时间，其相对保留时间不得超过规定值的±20%；待测制剂的特征图谱与对照特征图谱的相似度，为0.9～1.0。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，色谱柱优选为Thermo Hypersil GOLDTMaQ色谱柱,柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相B优选为0.05%的磷酸溶液；流速优选为1ml/min；检测波长优选为254nm；柱温优选为25℃。

5.如权利要求1至4任意一项所述的检测方法，其特征在于，所述两地汤的原料组成为：酒地黄，玄参，酒白芍，麦冬，地骨皮，阿胶。

6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述两地汤的原料组成和重量份为：酒地黄373份，玄参373份，酒白芍186份，麦冬186份，地骨皮112份，阿胶112份。

7.如权利要求1至4和6任意一项所述的检测方法，其特征在于：所述两地汤制剂为：粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂的固体制剂，或口服液、合剂、糖浆剂的液体制剂。