[发明专利]一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法在审
| 申请号： | 201910599175.1 | 申请日： | 2019-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN110226513A | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 何登骥;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 重庆汇鑫云强实业集团有限公司;重庆归胜农业科技研究院有限公司;何登骥 |
| 主分类号： | A01H1/02 | 分类号： | A01H1/02;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人： | 董芙蓉 |
| 地址： | 401320 重庆市*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 早稻 母体 生物技术育种 苦瓜 供体 远缘杂交 早稻种子 水稻 稻米 培育 申请 种植 | ||
1.一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，其特征在于，包括下述步骤：
S1：提取雀麦的DNA，将雀麦的DNA导入早稻；
S2：收集步骤S1中早稻种子种植培育作为母体；
S3：提取供体苦瓜的DNA；
S4：将供体的DNA导入步骤S2母体；
S5：收集步骤S4母体的远缘杂交种子。
2.根据权利要求1所述的一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，其特征在于，所述步骤S3包括下述步骤：
S31：称取供体幼苗的第一至第四个嫩叶0.2g，去除表面的DNA污染，置于研钵中与液氮共研成细粉；
S32：将供体细粉转入2ml离心管中，立即加入1000μl预热至65℃的CTAB抽提液，于65℃温育30min，然后常温混匀；
S33：放至室温，加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液，使充分混合，于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min；
S34：将上清液转移至新的离心管中，加入1/10体积的65℃的CTAB/NaCl溶液，充分混匀；
S35：再次加入1000μl的氯仿/异戊醇，充分混合，于4℃在离心机上以10000r/min离心5min，抽提至上清液澄清；
S36：将上清液转移至新的离心管中，加入1000μl CTAB沉淀液，混匀，室温放置15min后，于4℃10000r/min离心5min，弃上清；
S37：加入200μl的高盐TE缓冲液和2μlRNaseA储备液重悬沉淀，于37℃温育30min；
S38：加入2000μl预冷的无水乙醇，混匀，于4℃在离心机上以10000r/min离心15min；
S39：将沉淀用70％乙醇清洗两次后，晾干，加入50μlTE溶解沉淀。
3.根据权利要求1所述的一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，其特征在于，所述步骤S4还包括下述步骤：
S41：在母体水稻开花后3小时，将颖壳剪掉三分之一；
S42：去掉颖壳内雄花和已经开过的或未开过的花朵，保留正在开的花朵；
S43：将供体DNA导入颖壳内，然后套袋。
4.根据权利要求1所述的一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，其特征在于，所述步骤S5后还包括步骤S6，将步骤S5中收集的远缘杂交种子选育七代后获得生长稳定的新品系种子。
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