[发明专利]一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法

说明书

本发明公开了一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，包括下述步骤：S1：提取雀麦的DNA，将雀麦的DNA导入早稻；S2：收集步骤S1中早稻种子种植培育作为母体；S3：提取供体苦瓜的DNA；S4：将供体的DNA导入步骤S2母体；S5：收集步骤S4母体的远缘杂交种子。本专利申请中的早稻指的是早稻1803。采用本方法培育出来了种子，稻米中硒含量高达0.103mg/kg。将雀麦的DNA导入早稻是为了提升产量，然后将苦瓜的DNA导入母体是为了提升母体的硒含量。

技术领域

本发明涉及一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，属于水稻的育种方法技术领域。

背景技术

我国约60％的人口以稻米为主食，因而水稻增产是我国农业可持续发展和确保粮食安全的重大课题。由于工业化、城镇化进程正在吞食着稻田，要满足人口增长对粮食需求的挑战，保证国民经济的稳步发展，根本出路在于提高单位面积的产量潜力。粮食是一种特殊的战略商品，事关国计民生、政治稳定、社会安定。一旦缺粮，吃饭问题解决不了，经济发展和社会稳定就会失去坚实的基础。目前及今后很长一段时间已不可能靠扩大水稻种植面积增加水稻产量，而且由于其他方面对土地的需求，要维持现有的水稻种植面积也非常困难，未来粮食增产总量约80％需要来自单产的提高。由于农业设施不完善，农业投入低，水稻的生长环境还很脆弱；因而水稻生产的现状可描写为脆弱的作物生长在脆弱的环境下满足人们的“温饱”需求。提高单位面积的水稻产量潜力成为了水稻生产中的主要目标。由于水稻杂交技术面世，水稻的产量得到了大幅度的提升，但是稻米中硒的含量并不高。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，采用本方法培育出来了种子，稻米中硒含量高达0.103mg/kg。

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法，包括下述步骤：S1：提取雀麦的DNA，将雀麦的DNA导入早稻；S2：收集步骤S1中早稻种子种植培育作为母体；S3：提取供体苦瓜的DNA；S4：将供体的DNA导入步骤S2母体；S5：收集步骤S4母体的远缘杂交种子。本专利申请中的早稻指的是早稻1803。

前述的一种提升早稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中，所述步骤S3包括下述步骤：

S31：称取供体幼苗的第一至第四个嫩叶0.2g，去除表面的DNA污染，置于研钵中与液氮共研成细粉；

S32：将供体细粉转入2ml离心管中，立即加入1000μl预热至65℃的CTAB抽提液，于65℃温育30min，然后常温混匀；

S33：放至室温，加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液，使充分混合，于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min；

S34：将上清液转移至新的离心管中，加入1/10体积的65℃的CTAB/NaCl溶液，充分混匀；

S35：再次加入1000μl的氯仿/异戊醇，充分混合，于4℃在离心机上以10000r/min离心5min，抽提至上清液澄清；

S36：将上清液转移至新的离心管中，加入1000μl CTAB沉淀液，混匀，室温放置15min后，于4℃10000r/min离心5min，弃上清；

S37：加入200μl的高盐TE缓冲液和2μlRNaseA储备液重悬沉淀，于37℃温育30min；

S38：加入2000μl预冷的无水乙醇，混匀，于4℃在离心机上以10000r/min离心15min；

S39：将沉淀用70％乙醇清洗两次后，晾干，加入50μlTE溶解沉淀。

提取DNA过程中用到的试剂：

1、2-巯基乙醇(2-ME)