[发明专利]一种生产质粒的方法

权利要求书

1.一种生产质粒的方法，所述方法包括在加入固体培养基的液体培养基中培养含质粒的大肠杆菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述液体培养基是LB液体培养基、SOC液体培养基、2X YT液体培养基或TB液体培养基，优选是LB液体培养基。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述固体培养基是含有琼脂的培养基，其琼脂的含量在0.5％-2％之间，优选在0.7％-1％之间。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述固体培养基的成分中除了琼脂，还含有1％-4.5％的酵母浸出膏，优选还含有2.5％的酵母浸出膏。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其中所述固体培养基的成分中除了琼脂，还含有1％-5％的胰蛋白胨，优选还含有3％的胰蛋白胨。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述固体培养基的体积是液体培养基体积的30％-200％；优选所述固体培养基的体积是液体培养基体积的50％-100％；更优选所述固体培养基的体积是液体培养基体积的75％。

7.一种生产质粒的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)在48孔深孔板的底部凝固0.3ml-2ml的固体培养基；优选固体培养基的体积是0.6ml；

所述固体培养基中含有0.5％-2％的琼脂和1％-4.5％的酵母浸出膏；优选所述固体培养基中含有0.7％的琼脂和2.5％的酵母浸出膏；

所述固体培养基在凝固时液面与深孔板底部有30度-80度的夹角；优选所述夹角是45-65度；

(2)在固体培养基上再添加0.5ml-2ml的液体培养基，液体培养基是LB液体培养基、SOC液体培养基、2XYT液体培养基或TB液体培养基；优选液体培养基是LB液体培养基；

(3)在所述液体培养基上接入需要培养的含所述质粒的大肠杆菌菌种，再将深孔板置于转速在100-300转/分钟、温度为20摄氏度-45摄氏度的恒温摇床上培养5-48小时；优选将深孔板置于转速在220转/分钟、温度为37摄氏度的恒温摇床上培养14-20小时，得到菌液。