[发明专利]基于电化学传感器快速检测自由基的方法

说明书

本发明公开了一种基于电化学传感器快速检测自由基的方法，包括以下步骤：步骤一，制备羧基化g‑C₃N₄纳米粒子；步骤二，构建电化学传感器，制得ssDNA/carboxylated‑g‑C₃N₄NPs/CS电极；步骤三，建立检测^·OH自由基的标准曲线，配制不同浓度的^·OH自由基溶液，其中将ssDNA/carboxylated‑g‑C₃N₄NPs/CS电极为工作电极，用亚甲基蓝作为信号分子；步骤四，提取肉品中的^·OH自由基，利用ssDNA/carboxylated‑g‑C₃N₄NPs/CS电极对其进行检测。本发明方法快捷，灵敏度高，选择性好，有效地检测羟基自由基的浓度。

技术领域

本发明涉及一种肉品品质检测方法。更具体地说，本发明涉及一种基于电化学传感器快速检测自由基的方法。

背景技术

活性氧包括超氧阴离子自由基(O₂^·-)，单线态氧自由基(¹O₂)，1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH^·)，羟基自由基(^·OH)等，由于其化学活性较高，能够引起细胞破坏性的链式反应。在活性氧中，^·OH自由基被认为是最活跃和最有害的自由基，它与许多物质如糖、氨基酸、磷脂、核酸和有机酸等发生反应。这些反应能够引起脂质和蛋白质的过氧化，导致一些必需氨基酸的损失，并产生一些有毒物质。此外，高浓度的^·OH自由基引起的氧化应激会使细胞突变、凋亡，导致许多疾病，如高血压、动脉硬化、糖尿病、白内障、关节炎、癌症等。因此，对肉品中的^·OH自由基的定量检测十分必要。目前，毛细管电泳法、气相色谱-质谱法、液相色谱法、化学发光法、荧光和比色法等被应用于检测^·OH自由基。然而，这些方法耗时、繁琐，且需要专业的仪器操作人员，在实际生产中无法广泛应用。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其能够有效地检测羟基自由基的浓度，构建方法快捷，灵敏度高、选择性好，无需预处理过程；本发明所述电化学传感器对其他活性氧自由基有良好的抗干扰性。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种基于电化学传感器快速检测自由基的方法，包括以下步骤：

步骤一，制备羧基化g-C₃N₄纳米粒子，三聚氰胺与NaCl和KCl研磨成粉末后煅烧4h，制得盐熔块；所述盐熔块经过研磨、去盐，离心以及透析后，将制得的溶液冻干备用；

步骤二，构建电化学传感器，将所述步骤一制备的羧基化g-C₃N₄纳米粒子和壳聚糖固定在玻碳电极上制得羧基化g-C₃N₄NPs/CS电极，之后将ssDNA修饰在羧基化g-C₃N₄NPs/CS电极上，制得ssDNA/carboxylated-g-C₃N₄NPs/CS电极；

步骤三，建立检测^·OH自由基的标准曲线，配制不同浓度的^·OH自由基溶液，其中将ssDNA/carboxylated-g-C₃N₄NPs/CS电极为工作电极，用亚甲基蓝作为信号分子；

步骤四，提取肉品中的^·OH自由基，利用ssDNA/carboxylated-g-C₃N₄NPs/CS电极对其进行检测。