[发明专利]一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒及其制备方法，属于生物医药技术领域，采用超声双乳化法制备用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒，该纳米粒中包裹酞菁铁，而酞菁铁与血卟啉单甲醚化学结构类似，因此具有光动力效应和声动力效应，具有优异的光声成像性能，不但信号强而且成像信号持续时间长，并且由于酞菁铁有更宽的可见光吸收谱带，选择较长波长激发启动PDT，对组织及皮肤的损伤更小。另外，由于螯合Fe使得该材料兼具MRI成像效果。该纳米粒可用于光声成像/超声成像/MRI成像，以及可用于PDT/SDT治疗，该纳米粒具有靶向性，使用该纳米粒会给研究者提供更充裕时间对肿瘤及疾病进行检测和诊断。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒及其制备方法。

背景技术

现今临床治疗肿瘤的方法中，手术治切除是首选，化疗是治疗肿瘤最主要的手段，尤其是对于晚期阶段的转移性肿瘤。但是，细胞毒药物产生的副作用往往限制了化疗的效果。

靶向治疗是指靶向分子探针携带药物特异性地到达肿瘤部位，使药物更多的富集在肿瘤组织中，而在正常组织中的含量较少。由于药物被特异性地带到肿瘤部位，就可以对肿瘤部位进行集中作用，从而减少对正常组织的危害。但目前大多以纳米粒作为载体，依靠肿瘤的EPR效应聚集，但其易被血管内皮细胞网络吞噬，导致聚集到肿瘤部位的微粒数量有限，即使大量注射纳米粒也未能达到相应的富集效果，这也无形中增加了纳米粒的注射浓度和药物毒性。

另外，目前用于研究靶组织的外源性造影剂主要有重金属和荧光染料。常用的纳米金棒为重金属，不能被机体排除，且价格昂贵，有害健康；荧光染料吲哚氰绿虽然在临床被应用，但只能排除大部分，且副作用大和价格昂贵，这些外源性造影剂都具有一定的毒性，不能很好地应用于人体，因此需要寻找一种安全、价廉、无副作用的物质作为外源性造影剂用于光声成像技术。从治疗发方面，光敏剂是治疗的关键，目前临床使用较多的光敏剂为血卟啉衍生物或其它卟啉类药。这类光敏剂存在的缺点主要是其最大吸收波长不在对人体组织透过率较佳的红光区，故药效不够理想，且皮肤光毒性大等，使其临床应用受到限制。

因此，急需一种集靶向性、显像和治疗功能的一体化纳米粒，满足术中引导肿瘤划定界限、术后靶向治疗多种需求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒的制备方法；目的之二在于提供一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种用于肿瘤细胞的靶向多功能纳米粒的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)将分子量为7000-12000的聚乳酸-羟基乙酸共聚物和酞菁铁溶于三氯甲烷中，然后加入内水相，冰浴条件下超声乳化处理，再加入聚乙烯醇水溶液，再次超声乳化处理后加入异丙醇水溶液，获得混合液Ⅰ，搅拌所述混合液Ⅰ4-6h后去除所述三氯甲烷，最后离心获得沉淀Ⅰ，将所述沉淀Ⅰ以去离子水洗涤后再以去离子水重悬获得重悬液Ⅰ，将所述重悬液Ⅰ放置于0-4℃下，备用；所述混合液Ⅰ中聚乳酸-羟基乙酸共聚物、酞菁铁、内水相、聚乙烯醇和异丙醇的质量体积比为50:4-8:0.2-0.4:320-400:0.16-0.2，所述质量体积比的单位为mg:mg:mL:mg:mL；

(2)将N-羟基硫代琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶于浓度为0.1M，pH＝5的MES缓冲液中，然后加入步骤(1)中获得的重悬液Ⅰ中，获得混合液Ⅱ，搅拌所述混合液Ⅱ2-3h后离心获得沉淀Ⅱ，将所述沉淀Ⅱ以浓度为0.1M，pH＝8的MES缓冲液洗涤后再以浓度为0.1M，pH＝8的MES缓冲液重悬获得重悬液Ⅱ；所述N-羟基硫代琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与步骤(1)中聚乳酸-羟基乙酸共聚物的质量比为13-20:40-60:1；