[发明专利]AKR1B10化学发光定量检测试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及医药生物技术领域，具体地说，涉及了一种用磁微粒化学发光法检测醛酮还原酶1B10（AKR1B10）蛋白含量的定量试剂盒，用于癌症的筛查、诊断、疗效判断、预后评估或复发监测。所述试剂盒包括：AKR1B10校准品、AKR1B10质控品、链霉亲和素磁珠、生物素标记抗体、吖啶酯标记抗体、激发液1和2。待测血清中的AKR1B10与生物素标记抗体和吖啶酯标记抗体结合形成双抗体夹心复合物，加入链霉亲和素磁珠，用激发液1和2激发检测发光值，通过标准曲线计算得出样品中AKR1B10的浓度。采用本试剂盒进行检测具有稳定性好、灵敏度高、线性范围广等特点。

技术领域

本发明涉及医药生物技术领域，具体地说，涉及一种用磁微粒化学发光法检测醛酮还原酶1B10（AKR1B10）蛋白含量的定量试剂盒，用于癌症的筛查、诊断、疗效判断、预后评估或复发监测。该试剂盒基于夹心ELISA的免疫比浊法、酶联免疫法、时间分辨免疫荧光法、化学发光及电化学发光法。

背景技术

肝癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌和膀胱癌等均是目前多发和常见的癌症，并且致死率非常高。目前还缺乏有效地针对肝癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌和膀胱癌患者的早期检测、疗效判断、预后评估或复发监测的方法。因此，急需新的特异性好、灵敏度高、操作简易、对人体无危害、能在癌症发病的早期及时诊断、并且对于疗效判断、预后评估或复发监测等具有实用价值的靶标和检测评估方法。

通过本发明研究发现，AKR1B10是一种人类醛酮还原酶蛋白，属于一种全新的肿瘤蛋白标志物，可用于多种癌症病变的检测。AKR1B10在肝癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌和膀胱癌等肿瘤中高表达，促进肿瘤的生长并产生耐药性。通过抑制AKR1B10可以抑制肿瘤的生长，并增加肿瘤对化疗药物的敏感性。在肿瘤细胞中表达的AKR1B10可以分泌到血液中，使癌症患者血液中AKR1B10蛋白的表达水平升高。因此，通过检测血清中AKR1B10蛋白的水平，可以提示肿瘤的存在/复发，及抗癌治疗或复发监测的效果。

发明内容

针对上述问题，我们开发了一种检测肿瘤特异性标志物醛酮还原酶1B10（AKR1B10）蛋白的化学发光定量检测试剂盒。该试剂盒将化学发光技术与磁分离技术相结合，用于受试者血清、尿液、乳汁、肠液、大便或组织样本中的AKR1B10蛋白的检测，采用本试剂盒进行检测具有稳定性好、灵敏度高、线性范围广等特点。

具体而言，本发明涉及如下内容：

1.本发明涉及一种化学发光法定量检测醛酮还原酶1B10（AKR1B10）蛋白的测定试剂盒。

2.项1中所述试剂盒，用于癌症的筛查、诊断、疗效判断、预后评估或复发监测，包括：

a）利用所述试剂盒检测来自受试者样本中AKR1B10蛋白的水平；

b）将a中测得的AKR1B10蛋白水平与正常样本中的相应水平比较。

3.项1-2中所述试剂盒包括：AKR1B10校准品、AKR1B10质控品、链霉亲和素磁珠溶液、生物素标记抗体、吖啶酯标记抗体、激发液1和激发液2。

4.项3中所述AKR1B10校准品和AKR1B10质控品为AKR1B10抗原以一定浓度溶解于样品缓冲液中配制而成。

5.项3中所述试剂盒中：

a) 所述生物素标记抗体为生物素标记的兔抗AKR1B10多克隆抗体，作为试剂盒的捕获抗体，特异性的识别AKR1B10抗原；

b) 所述吖啶酯标记抗体为吖啶酯标记的鼠抗AKR1B10单克隆抗体，作为试剂盒的检测抗体，可特异性的识别AKR1B10抗原。