[发明专利]一种miRNAs原料液的提取方法在审
| 申请号： | 201910607684.4 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110283815A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 胡小云 | 申请（专利权）人： | 江苏核泰生态科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 225300 江苏省泰州市陆*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 金银花 原料液 称取 大规模工业化生产 筛选 环保保护 食用安全 颜色均匀 植物提取 质量均匀 电子秤 分选机 可循环 毒害 保证 | ||
1.一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，所述方法包括：
S101：选取颜色都为黄色的金银花，并保证金银花的颜色均匀，然后使用分选机筛选出质量均匀的金银花，然后使用电子秤称取400g筛选出的金银花，然后将称取的400g金银花均等的分成两份，并将两份金银花分别标记为A、B；
S102：将A份金银花与B份金银花分别放入到两个相同的金银花清洗机内，使用金银花清洗机去除A份金银花与B份金银花表面的杂质与残留农药，对A份金银花与B份金银花起到清洗、浸泡、杀菌消毒和固色的作用，然后将清洗后的A份金银花与B份金银花分别放在两个相同的烧杯内，并将A份金银花对应的烧杯标记为C，B份金银花对应的烧杯标记为D；
S103：将C烧杯内的A份金银花加入到中药粉碎机内，通过中药粉碎机将A份金银花粉碎，并将A份金银花的细胞壁击破，同时将D烧杯内的B份金银花放置在阴凉处以备后续使用；
S104：将中药粉碎机粉碎后的A份金银花倒入到反应釜内，并向反应釜内加入500ML的纯净水，然后将反应釜内部的温度调节至30℃～120℃，通过反应釜震荡搅拌5min-300min，使粉碎后的A份金银花内部的miRNAs从细胞释放出来，并进入到纯净水中，从而达到浸提的效果，从而制备出miRNAs初始原料液；
S105：然后将反应釜内部的miRNAs初始原料液倒出，并使其降温至常温状态，然后使用粗过滤筛将miRNAs初始原料液中的杂质过滤出，然后使用细胞过滤筛将miRNAs初始原料液中的细碎杂质过滤出，从而得到最终的miRNAs原料液；
S106：使用定量RT-PCR方法对过滤后的miRNAs原料液进行检测，如果检测到miRNAs原料液中的miRNAs比重较小时，使用D烧杯内的B份金银花重复S104、S105步骤，从新制备新的miRNAs原料液。
2.根据权利要求1所述的一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：
所述分选机利用空气悬浮原理选取出重量相近的金银花。
3.根据权利要求1所述的一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：
所述中药粉碎机用于粉碎A份金银花的时间为20s～600s，所述中药粉碎机用于粉碎B份金银花的时间为20s～600s。
4.根据权利要求1所述的一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：
所述中药粉碎机粉碎后的A份金银花和B份金银花粒径为25～800目。
5.根据权利要求1所述的一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：
所述粗过滤筛的目数为500目。
6.根据权利要求1所述的一种miRNAs原料液的提取方法，其特征在于，包括：
所述细胞过滤筛的目数为1800目。
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