[发明专利]一种鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用有效
申请号: | 201910612776.1 | 申请日: | 2019-07-08 |
公开(公告)号: | CN110172521B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 戴国俊;于海亮;王晓慧;邹文斌;糜长浩;张跟喜;张涛;谢恺舟;王金玉;王宏胜;施会强;邱聪 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 柔嫩 艾美尔球虫 抗性 间接 选择 分子 标记 应用 | ||
1.一种基于鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记培育鸡柔嫩艾美尔球虫抗病新品种或新品系的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
1)提取试验鸡基因组DNA;
2)设计并合成鸡白介素8基因5'调控区包含-360bp处SNP突变区域的引物对,对步骤1)得到的基因组DNA进行PCR扩增,得到扩增产物;
3)将步骤2)得到的扩增产物进行DNA碱基序列测定;
4)根据步骤3)的测序结果,寻找鸡白介素8基因5'调控区-360 bp处T→C的突变,确定目标突变位点待测个体的基因型,选择基因型为TT的个体留种繁殖;
所述步骤2)中的引物对是: F:AAACCAGCAACACAAAGTC; R:CATCTCAGCAAGTGCCAAG。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中引物对的设计方法是:根据Gen Bank中已公布的鸡白介素8基因序列GeneID396495,使用Primer Premier 5.0对鸡白介素8基因5'调控区包含-360bp处T→C突变在内的长度为576 bp区域进行引物设计。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中PCR扩增的条件是:95℃预变性5 min;95℃变性30 s,退火温度60℃,退火30s,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸10min,4℃保存。
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