[发明专利]一种鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用

说明书

本发明属于家禽育种领域，涉及一种鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用。该鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记是鸡白介素8基因5'调控区‑360bp处的SNP突变形成的基因型TT。本发明提供了一种实现在非攻毒条件下对抗性指标的间接选择、提高选择群鸡球虫抗性以及可培育新品种或新品系的鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用。

技术领域

本发明属于家禽育种领域，涉及一种分子标记及应用，尤其涉及一种鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用。

背景技术

鸡球虫病是一种严重危害养殖企业的流行性急性寄生虫病，以10～60日龄的鸡发病率最高，主要特征是患鸡消瘦、食欲下降、贫血和血痢，病愈后鸡生长受阻，增重和产蛋均会受到影响。全世界每年因鸡球虫病造成的经济损失高达30亿美元，而我国每年用于防治鸡球虫病的药物费用也达到了数亿元人民币，占鸡病全部防治费用的近三分之一。

长期以来，鸡的球虫病以药物防制为主，但是如果长期使用一种药物不但会产生鸡机体耐药性的问题，降低药物的防治效果，增加养殖成本。大量研究表明鸡球虫病抗性在同一品种内或不同品种间存在变异性，这给鸡球虫病抗性选择提供了依据。通过大剂量鸡球虫孢子化软囊攻毒可以测定相应的抗性指标，从而实现鸡球虫病常规选育，但攻毒风险大，要有专门的设施条件。所以通过与免疫有关基因分子遗传标记与球虫病抗性间的关系，在非球虫软囊攻毒或感染的情况下通过分子标记辅助选择鸡球虫病抗性个体，方法安全，意义重大。

发明内容

发明目的：为了解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种实现在非攻毒条件下对抗性指标的间接选择、提高选择群鸡球虫抗性以及可培育新品种或新品系的鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记及应用。

技术方案：为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记，所述鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记是鸡白介素8基因5′调控区-360bp处的SNP突变形成的基因型TT。

如前所记载的鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记在培育鸡柔嫩艾美尔球虫抗病新品种或新品系时的应用。

如前所记载的鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记在提高群体鸡柔嫩艾美尔球虫的抗性时的应用。

一种基于如前所记载的鸡柔嫩艾美尔球虫抗性间接选择的分子标记的培育鸡柔嫩艾美尔球虫抗病新品种或新品系的方法，所述方法包括以下步骤：

1)提取试验鸡基因组DNA；

2)设计并合成鸡白介素8基因5′调控区包含-360bp处SNP突变区域的引物对，对步骤1)得到的基因组DNA进行PCR扩增，得到扩增产物；

3)将步骤2)得到的扩增产物进行DNA碱基序列测定；

4)根据步骤3)的测序结果，寻找鸡白介素8基因5′调控区-360bp处T→C的突变，确定目标突变位点待测个体的基因型，选择基因型为TT的个体留种繁殖。

作为优选，本发明所采用的步骤2)中的引物对是：

F：AAACCAGCAACACAAAGTC；

R：CATCTCAGCAAGTGCCAAG。

作为优选，本发明所采用的步骤2)中引物对的设计方法是：根据Gen Bank中已公布的鸡白介素8基因序列GeneID396495，使用Primer Premier 5.0对鸡白介素8基因5′调控区包含-360bp处T→C突变在内的长度为576bp区域进行引物设计。

作为优选，本发明所采用的步骤2)中PCR扩增的条件是：95℃预变性5min；95℃变性30s，退火温度60℃，退火30s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸10min，4℃保存。