[发明专利]一种用于转基因茄子的再生培养基及其应用

说明书

本发明涉及一种用于转基因茄子的再生培养基及其应用，属于转基因植株的获取方法技术领域。为解决转基因茄子再生效果差的问题，本发明提供了一种用于转基因茄子的再生培养基，主要组分包括噻苯隆、N⁶‑[异戊烯]‑腺嘌呤、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇和盐酸硫胺素。转基因培养基所含组分为转基因茄子的再生培养提供了丰富的微量元素，噻苯隆和N⁶‑[异戊烯]‑腺嘌呤可使转基因茄子再生效率的增长率达到158％，其不仅诱导效率高，不定芽的分化率高，而且成本低，大大节约了组培成本。将本发明提供的再生培养基应用于转基因茄子的育种，提高了转基因茄子育种的转化效率，缩短了转化周期，为转基因茄子的高效育种提供了有利准备。

技术领域

本发明属于转基因植株的获取方法技术领域，尤其涉及一种用于转基因茄子的再生培养基及其应用。

背景技术

利用重组DNA技术将遗传信息转化为植物基因组已成为植物生物学基础研究和栽培植物改良的重要策略。将外源基因倒入植物细胞或组织，使之定向重组遗传物质，改良植物性状，培育优质高产作物新品种。自1983年首例转基因植物诞生，天然植物基因工程开始在人工控制下定向改良植物的遗传性状。

与常规育种方法相比，转基因技术不受亲缘关系的限制，可实现动物、植物和微生物间遗传物质的交流，从而充分利用自然界存在的各种遗传资源；有效打破有利基因和不利基因的连锁，充分利用有用基因，加快育种进程，缩短育种年限。

然而，这种方法在许多植物物种中应用存在一个严重的障碍，没有可靠的体外转化和再生程序。茄子是一种重要的经济作物，是我国的重要果菜之一，易受黄萎病、青枯病、棉疫病等多种病害以及线虫和各种昆虫的侵害。在转基因茄子育种过程中，茄子组织培养具有很强的基因型特异性，再生效果不理想，在多数试验中植株的再生周期长或分化频率低，其不定芽的生长能力较差，又得甚至停留在芽诱导阶段而不能进一步生长，这在很大程度上限制了茄子基因工程的研究进展。

发明内容

为解决转基因茄子再生效果差的问题，本发明提供了一种用于转基因茄子的再生培养基及其应用。

本发明的技术方案：

一种用于转基因茄子的再生培养基，包括如下组分：0.1～0.5μg/mL噻苯隆、15～20mM NH₄NO₃、12～16mM KNO₃、2～2.5mM CaCl₂·2H₂O、1～1.2mM MgSO₄·7H₂O、0.8～1.0mMKH₂PO₄、3～4μM KI、0.05～0.08mMH₃BO₃、0.05～0.08mM MnSO₄·4H₂O、20～25μM ZnSO₄·7H₂O、0.5～0.8μM Na₂MoO₄·2H₂O、0.05～0.08μM CuSO₄·5H₂O、0.05～0.08μM CoCl₂·6H₂O、0.05～0.08mM EDTA，pH5.7～5.9。

进一步的，还包括10～15μg/mLN⁶-[异戊烯]-腺嘌呤。

进一步的，还包括120～150mg/L肌醇、1.0～1.5mg/L烟酸、1.0～1.5mg/L盐酸吡哆醇、0.2～0.5mg/L盐酸硫胺素。

进一步的，还包括20～50g/L蔗糖和5～8g/L琼脂。

本发明提供的用于转基因茄子的再生培养基在获得茄子转基因植株中的应用，具体应用方法如下：