[发明专利]一种用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种联合检测血清标志物在制备用于肝癌早期筛查和诊断的试剂盒中的应用，其特征在于：所述联合检测血清标志物由PTEN、PTCH1、IDH1、SRSF2、MSH2和NPM1共6种基因编码的蛋白组成；

所述PTEN基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；

所述PTCH1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

所述IDH1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列；

所述SRSF2基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；

所述MSH2基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列；

所述NPM1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列；

所述试剂盒的使用方法，包括以下步骤：

1)对所述联合检测血清标志物进行包被，封闭后清洗；

2)与待检测血清进行一抗孵育，清洗，再进行二抗孵育，再清洗；

3)显色系统显色后终止反应，测定吸光度值；

4)以OD₄₅₀-OD₆₂₀为相对OD值，然后扣去空白对照，将各个指标的吸光度值代入以下公式，计算预测概率P值大小；

P＝1/(1+Exp(-(3.504-6.810×OD_PTEN-3.616×OD_PTCH1+20.294×OD_IDH1-9.224×OD_SRSF2-11.667×OD_MSH2+3.770×OD_NPM1)))；

式中OD_PTEN、OD_PTCH1、OD_IDH1、OD_SRSF2、OD_MSH2、OD_NPM1分别为各个指标的相对OD值减去空白对照后的吸光度值；

当P值≥0.5时，初步判定为疑似肝癌样品；

当P值＜0.5时，初步判定为正常样品。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述联合检测血清标志物包被于固相载体上。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括阳性对照血清、阴性对照血清、封闭液、样本稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。